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- 英文名:
2,3-Dihydro-1H-benzo[d]imidazo[1,2-a]imidazole
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20
- 供应商:
上海吉至生化科技有限公司
- CAS号:
24134-26-7
- 规格:
,250mg
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文献和实验mM咪唑)悬浮,100ml用5~10ml缓冲液(约当2~5ml每克菌量),视悬浮后的菌液浓度而定;5、反复冻融法破碎细胞:做到14步时由于时间原因不能立即继续后面的操作,可将菌悬液放于-70℃冰箱中冷冻;也可用反复冻融的方法来破碎细胞,在-70℃冻融,在室温下溶解,反复冻融3~4次;6、加Lysozyme至1mg/ml(1ml加10ul),在冰上孵育30min~1h;7、200~300W超声破碎,2s×30次,停顿2s;若菌种较多可以增加破碎次数。注意超声破碎时间,不可太长,否则温度升高易导致蛋白
【原创】真核表达His蛋白,进行天然构象蛋白纯化的心得和疑问。
由于要做酶活性实验,所以选择真核表达His标签蛋白进行非变形的纯化。(避免了原核表达可能得到没功能的蛋白。)先上图上真相:这个说明了:细胞超声裂解后,离心沉淀的碎片里含少量His标签的过表达目的蛋白(第一道),上清里含大量His蛋白(第二道)。之后用特殊的含有镍的树脂小球纯化His蛋白,由于裂解液体积太大了,就分了两次加到柱子里。第一次加进去之后4度孵育1h,然后弃流出液(第三道),第二次把剩下的裂解液加进去,同样4度孵育1h后弃流出液(第四道)然后用漂洗液洗2次柱子里的树脂,使得非特异性黏着
指数的差异. 1 实验部分 1.1 试剂与仪器 分别配制一定浓度的多环芳烃萘、联苯、二氢苊、芴、菲、蒽、荧蒽、芘、苯并(a)蒽、�、苯(并k)荧蒽、苯并(e)芘、苯并(a)芘、�、�的苯溶液和水溶液. HP6 890气相色谱仪(Hewlett Packard Inc.)配氢火焰检测器和化学工作站,SE-54(30 m×0.25 mmi.d.,0.25 μm,J&WScientificInc.USA)石英毛细管柱. 气相色谱用固相微萃取器及萃取头(Supelco
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