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- 文献和实验
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- 保存条件:
RT,Dry
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见产品COA
- 英文名:
2×YT培养基
- 库存:
20
- 供应商:
上海吉至生化科技有限公司
- CAS号:
无
- 规格:
BR,250g
超干溶剂,格式试剂,氘代试剂,色谱溶剂,医药中间体,分析对照品,生化试剂盒,染色液,现货10000+
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文献和实验1从微量培养基平皿中挑取单个菌落,接种于5ml 2×YT培养基(17g蛋白胨,10g Bactoyeast,5g NaCl,加水至1 000ml)中,37℃振荡培养过夜。 2取上述过夜菌1∶100稀释接种入500ml新鲜的2×YT培养液中,37℃振荡培养至OD=05~07,约25~3h。 3将上述带有菌液的三角瓶置冰浴15~30min
。对低拷贝数质粒,提取时可加大菌体用量并加倍使用溶液P1、P2 和 P3,可以有助于增加质粒提取量和提高质粒质量。 13. 溶液使用不当: 溶液 P2、P3 在温度较低时可能出现浑浊,应置于 37℃ 保温片刻直至溶解为清亮的溶液,才能使用。 14. 吸附柱过载: 不同产品中吸附柱吸附能力不同,如果需要提取的质粒量很大,请分多次提取。若用富集培养基,例如 TB 或 2×YT,菌液体积必须减少;若质粒是非常高的拷贝数或宿主菌具有很高的生长率,则需减少 LB 培养液体积。 15. 质粒未全部溶解
一、材料与试剂 1. SOBor2xYT2. MES3. 足够80个管子的TFB(50 mL)/400转化DMSO4. 5 M NaCl 二、仪器 1. 离心机 三、步骤 1. 室温下在5 ml SOB或2×YT中接种菌并且培养过夜。2. 加过夜培养的菌到500 ml 的SOB或2×YT,其装在4L瓶中以最大限度的透气。加入36 ml 5 M 的NaCl,在30℃下培养。3. 大约3 h,OD600达到0.5。4. 离心细胞。取沉淀,吸取
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