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- 百奥莱博
- GS1588-FMP
- 北京
- 2025年07月10日
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- 库存：
478
- 英文名：
Immunohistochemistry Kit(Apply to rabbit or mouse primary antibody)
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
冷藏(2-8℃)
- 规格：
20次|50次
特别提示：包括免疫组化试剂盒(适用于兔/小鼠一抗)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：免疫组化试剂盒(适用于兔/小鼠一抗)
英文名称：Immunohistochemistry Kit(Apply to rabbit or mouse primary antibody)
产品货号：GS1588
产品规格：20次|50次
储存条件：冷藏（2-8℃）
概述
该免疫组化试剂盒适用范围为石蜡包埋组织切片，也可用于固定后的冰冻切片。
特点
- 操作简便：无需太多准备，拿到试剂盒既能开展试验。重现性好：实验结果重复性高。
应用
用于免疫组织化学实验，两种包装分别可用于20张和50张切片。
使用说明
1.组织固定：在脱蜡之前，将切片60℃恒温箱中烘烤60分钟。
2.脱蜡：将切片用二jiǎ苯浸泡10分钟，更换二jiǎ苯后再浸泡10分钟。
3.水化：分别用无水乙醇浸泡5分钟；95%乙醇中浸泡5分钟；85%乙醇中浸泡5分钟；75%乙醇中浸泡5分钟。
4.洗涤：ddH2O浸泡5分钟，清洗3次。
5.抗原修复（煮沸法）：压力锅中加入足以淹没切片的10mmol/ml的枸橼酸盐缓冲液（pH 6.0）（配制：将复性剂溶于相应体积ddH2O中，混匀），加热至沸腾，切片置耐热塑料切片架上，放入锅中，盖好锅盖，扣上压力阀，继续加热，设置保压3min，时间到后打开放气阀放气，压力归零后开锅盖将内锅取出放置室温冷却，待溶液冷却至室温后取出切片（约30 min）。
6.洗涤：ddH2O浸泡5分钟，清洗2次，PBST浸泡5分钟，清洗2次
7.灭活酶：每张切片滴加50μl灭活酶试剂，室温避光处理15分钟。
8.洗涤：PBST浸泡5分钟，清洗3次。（第一次迅速倒掉）
9.封闭：每张切片滴加3%BSA-PBST 50 μl，湿盒中室温封闭30分钟。
10.加一抗：弃去封闭液，每张切片滴加50 μl一抗，4℃湿盒中孵育过夜或37℃ 1小时。
11.复温：次日取出切片，室温复温40分钟
12.洗涤：PBST浸泡5分钟，清洗3次。（第一次迅速倒掉）
13.加酶标二抗：每张切片滴加HRP标记的二抗（抗兔/小鼠）25μl，室温或37℃孵育30分钟。
14.洗涤：PBST浸泡5分钟，清洗3次。（第一次迅速倒掉）
15.显色（DAB法）：每张切片滴加50 μl显色液（显色液配制：85%ddH2O+ 5%DAB缓冲液+5%DAB底物+5%DAB色原，避光现配现用，按需要量配制），湿盒中显色5分钟。
16.终止显色：用蒸馏水终止显色反应。
17.复染：每张切片滴加50 μl苏木素体细胞快速染色液，染色5分钟，用蒸馏水冲洗干净。
18.脱色反蓝：将切片放入1%盐酸~乙醇中脱色3~5秒后迅速取出放入蒸馏水中终止，再放入PBST中反蓝5分钟。
19.封片：分别在75%乙醇中浸泡5分钟；85%乙醇中浸泡5分钟；95%乙醇中浸泡5分钟；无水乙醇中浸泡5分钟。用二jiǎ苯浸泡10分钟，更换二jiǎ苯后再浸泡10分钟。之后在切片上加中性树胶，加盖玻片。
20.观察：显微镜。
组份
复性剂（溶解前请混匀）
HRP标记的二抗（抗兔/小鼠）
DAB缓冲液（20×）
DAB底物（20×）
DAB色原（20×）
苏木素体细胞快速染色液
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文献和实验【信息】Rabbit anti-GAPDH(SF-PA005)（兔抗 GAPDH 多克隆 IgG 抗体）招代理
GAPDH多克隆IgG抗体源自重组人GAPDH蛋白 C 端片段免疫新西兰大白兔。 特异性 兔抗 GAPDH 多克隆 IgG 抗体推荐用于人、 大鼠、小鼠及其它哺乳动物 GAPDH 蛋白检测，特异性?选?/p> 纯化 分离抗血清并亲和层析纯化。 应用 免疫组化 1:100-1:400 免疫荧光 1:100-1:400 Western Blot 1:400-1:800 ELISA 1:2,000-1:8,000 最优稀释比例依不同实验具体情况而定。 保存
原理 抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究。 众所周知，抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性，即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来，以其作为抗原或半抗原去免疫实验动物，制备特异性抗体，再用这种抗体（第一抗体）作为抗原去免疫动物制备第二抗体，并用某种酶（常用辣根过氧化物酶）或生物素等处理后再与前述抗原成分结合
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