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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
262
- 英文名:
In Situ Cell Apoptosis Detection Kit, AP
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
冷冻(-20℃)
- 规格:
20次|100次
| 货号 | 规格 | 产品价格 |
|---|---|---|
| GS0249-IXO | 20次|100次 | ¥380 - 3800 |
| GS0249-RZH | 20次|100次 | ¥380 - 3800 |
| GS0249-WJD | 20次|100次 | ¥380 - 3800 |
特别提示:包括TUNEL原位细胞凋亡检测试剂盒(AP)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:TUNEL原位细胞凋亡检测试剂盒(AP)
英文名称:In Situ Cell Apoptosis Detection Kit, AP
产品货号:GS0249
产品规格:20次|100次
储存条件:冷冻(-20℃)
概述
Apoptosis is essential in many physiological processes.Several methods have been described to identify apoptotic cells.Endonucleolysis is considered as the key biochemical event of apoptosis,resulting in double-stranded,low molecular weight DNA fragments as well as single strand breaks in high molecular weight DNA.Those DNA strand breaks can be identified by labeling free 3’-OH termini with modified nucleotides in an enzymatic reaction.Terminal deoxynucleotidyl transferase(TdT)can catalyze DIG-dUTP to free 3’-OH DNA ends.The DIG-dUTP is first react with biotin-conjugated anti-digoxin antibody,which subsequently associate with streptavidin-AP(SABC-AP).Combined with BCIP/NBT Chromogenic Reagent,apoptotic cells stain Purple-blue analyzed under microscopy.
组份
Component A:Labeling Buffer;Component B:TdT(20X);Component C:DIG-dUTP(20X);Component D:Blocking Reagent;Component E:Biotin-conjugated anti-digoxin antibody;Component F:SABC-AP(100X);Component G:Protein K(200X);Component H:BCIP/NBT Chromogenic Reagent(20X);Component I:Antibody Dilution;Positive Control
我公司销售的TUNEL原位细胞凋亡检测试剂盒(AP),质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被染色。由此,TUNEL成为了检测DNA片段化(细胞凋亡)的最常用方法。(以TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒(增强型,绿色荧光)为例) TUNEL检测:使用20 U/ml Dnase处理Hela细胞10分钟。 二、TUNEL实验中关键步骤 1. 充分脱蜡和水化。脱蜡前可先将切片在 60ºC烤片 20 min,再使用二甲苯脱蜡2次,每次 5-10 min;而水化一般建议用梯度乙醇从高浓度到低浓度浸洗,便于后期试剂能充分、均匀的结合反应
用了许多方法检测小鼠的肝脏、脑部、睾丸等组织的细胞凋亡,其中 TUNEL 法做的最多,我购买的试剂盒主要是 roche、 promega 公司,结果大多数成功,偶尔也有失败,下面我把实验中的关键问题与大家共享一下,同时也希望能对初学者有所帮忙。 TUNEL 法的实验原理 基本原理:对不同组织切片先增加细胞膜通透性,然后让 rTDT 和生物标记的 dTUTP 进入细胞内,在 rTDT 的辅助下 dTUTP 与核断裂的 DNA 3』-OH 结合,再用 HRP 标记的链霉
细胞仪检测。 二、荧光显微镜原位检测 注:本方法优点是可以原位观察细胞凋亡,缺点是部分凋亡由于贴壁不牢而检测不到。 如果条件可以,在诱导凋亡后,用多孔板离心机300 g离心5 min。 吸除细胞培养液,用PBS洗涤两次(如果条件允许,在此前做步骤A)。 离心后弃上清,加入500 μL稀释成1 × 的Annexin V Binding Buffer工作液。 加入5 μL的荧光素标记-Annexin V和5μL的细胞核染色液。 移液器轻轻混匀,室温避光孵育15~20 min。 Annexin V Binding
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