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- 文献和实验
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- 库存:
大量
- 供应商:
BestBio贝博生物
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
50T
1.蛋白浓度低?
植物核糖体蛋白丰度比较低,在条件允许的情况下,需要尽可能加大样品的上样量以提高蛋白浓度。
2.用什么方法定量蛋白?
建议用BCA法。不适合用Bradford法,因为试剂A中含有干扰Bradford法的组份,导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系,则可以用Bradford法定量。
3.提取的蛋白具有活性吗?
本试剂盒不含有离子型去垢剂组份,不破坏蛋白的结构,没有对蛋白质之间原有的相互作用的破坏,蛋白均保持其天然构象和活性。
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文献和实验8. 置振荡器振荡20分钟。
9. 在2000×g力离心5分钟。弃沉淀,收集上清。
10. 将上清在5000×g力离心5分钟。弃沉淀,收集上清。
11. 将上清在10000×g力离心10分钟。弃沉淀,收集上清。
12. 将上清在4℃,100000×g力条件下离心60分钟。弃上清,收集沉淀。
13. 弃上清,在沉淀中加入100μl核糖体蛋白提取液C,充分混匀。
14. 在4℃条件下振荡20-30分钟。
15. 在4℃,10000×g条件下离心5分钟。
16. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到核糖体蛋白。
17. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
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