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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Strawberry multiplier phytoplasma
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件:
-20度
- 规格:
50次
中文名称:草莓簇生植原体PCR试剂盒
英文名称:Strawberry multiplier phytoplasma
规格:50次
运输:低温
保存:-20度
有效期:一年
货期:一周
产品及特点
1.即开即用,用户只需要提供样品模板,操作简单,定量准确快速。
2.荧光定量 PCR 检测,反应特异性强。
3.提供阳性对照,便于分析实验结果。
4.PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳,本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
运输及保存
低温运输,-20℃保存,保存期限一年。
使用方法
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取细菌样品 DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 stn 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
1.标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2.用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(最好用带芯枪头,下同)。
3.先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
1.在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
2.换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5 拷贝/μL 的阳性对照。
3.换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。
4.NC 管中不加任何阳性对照。
5.从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值, 并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
一.PCR 检测(20 μL 体系)
1.在 PCR 管中加入下列成分(待测样品需要做三次重复,下表只列出一次)
注:仅 ABI7500、7700 和 7900 仪器需要使用 ROX 作为对照,其他荧光 PCR 仪器(如 iCycler IQ、MJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、RotorGene 3000、RotorGene 6000 和 LightCycler480)不需要使用 ROX。
建议 PCR 反应参数(具体 PCR 参数可以根据仪器不同而自行优化)
3. 数据采集
按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,最大吸收光谱在 471 nm,结合 DNA 时的最大吸收光谱在 500 nm, 最大发射光谱在 530 nm。
四、数据处理
以 stn 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
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文献和实验蔷薇科,草莓属。矮生多年生草本。匍匐茎常在花后产生,被毛。掌状三出复叶,小叶较大,卵圆形或菱形,先端圆钝,基部楔形,边缘具粗锯齿,上面微被柔毛,有光泽,下面蓝白色,沿叶脉生有粗毛。基生叶叶柄长 10~ 30厘米,有毛。聚伞花序或花簇生,花梗长 2~ 5厘米,有毛。副萼片披针形,萼片卵形。花白色或略带红色。雄蕊、雌蕊多数,生在圆锥形的花托上,果成熟时,花托增大变为肉质。瘦果,生于肉质花托的凹陷内。花托多汁,暗红色,是食用的部分。本种系杂交而成,由国外引种,现各地广为栽培。花托
、玉米、地锦草、斑地锦、狗牙根、草莓、黄瓜、葡萄、凌霄、牵牛、豇豆、痛豆。(三)叶1.复叶的类型(1)奇数羽状复叶取槐树叶观察,可见其羽状复叶的顶端有一顶生小叶存在,整个羽状复叶的小叶数目为单数。(2)偶数羽状复叶取枫杨叶观察,可见其羽状复叶的顶端没有一顶生小叶,整个羽状复叶的小叶数目为偶数。观察合欢、南天竹的叶,看看它们分别属于几回羽状复叶。(3)掌状复叶观察木通、七叶树等植物的叶,可见其小叶都着生于总叶柄的顶端,(4)羽状三出复叶取大豆的叶观察,可见其叶有三张小叶组成,其中一张小叶生于总叶柄
,宽 1.5~ 12毫米,下面密被锈绒毛,花白色,花冠 5裂,裂片分离。 岩须生于中国西南部高山。为常绿半灌木,叶覆瓦状排列,披针状长圆形,花单生于叶腋,白色,下垂。在高纬度地区如北美,常见用于庭园观赏。 吊钟花分布于广东、广西、云南。为落叶或半落叶灌木,叶互生,椭圆形,全缘,聚生枝顶,花下垂,数朵成伞形花序,花冠宽钟状,长 1厘米,粉红或红色。观赏植物。 马醉木分布中国东部。为常绿灌木,叶被针形,聚生枝顶,总状花序数枝簇生枝顶,长 8~ 12厘米,花冠坛状,白色 。枝叶或花粉均有毒。同属植物含梫
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