- ¥1490
- 联迈生物
- LM13-1510
- 中国/上海
- 2025年11月10日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Burkholderia gladioli pv. alliicola
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件：
-20度
- 规格：
50次
中文名称：洋葱腐烂病菌PCR试剂盒
英文名称：Burkholderia gladioli pv. alliicola
规格：50次
运输：低温
保存：-20度
有效期：一年
货期：一周
产品及特点
1.即开即用，用户只需要提供样品模板，操作简单，定量准确快速。
2.荧光定量 PCR 检测，反应特异性强。
3.提供阳性对照，便于分析实验结果。
4.PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳，本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
运输及保存
低温运输，-20℃保存，保存期限一年。
使用方法
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取细菌样品 DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 stn 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
1.标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2.用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（最好用带芯枪头，下同）。
3.先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
1.在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
2.换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5 拷贝/μL 的阳性对照。
3.换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。
4.NC 管中不加任何阳性对照。
5.从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值， 并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
一．PCR 检测（20 μL 体系）
1.在 PCR 管中加入下列成分（待测样品需要做三次重复，下表只列出一次）
注:仅 ABI7500、7700 和 7900 仪器需要使用 ROX 作为对照，其他荧光 PCR 仪器（如 iCycler IQ、MJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、RotorGene 3000、RotorGene 6000 和 LightCycler480）不需要使用 ROX。
建议 PCR 反应参数（具体 PCR 参数可以根据仪器不同而自行优化）
3. 数据采集
按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，最大吸收光谱在 471 nm，结合 DNA 时的最大吸收光谱在 500 nm， 最大发射光谱在 530 nm。
四、数据处理
以 stn 阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴，以 Ct 值为纵轴，通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
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文献和实验引起白菜等多种蔬菜发生软腐病的细菌。主要的病原菌有两种，二者形态很相似，仅在生理上稍有不同。菌体均为短杆状，周围有2～ 8条鞭毛。在较老的培养中是单杆的，但在液体培养中可以连成链状。不生芽孢，革兰氏染色阴性。平时只能在有机质中才能生活，病菌只能从白菜等植物体的伤口侵入，能产生分解细胞间隙中间层（果胶素）的酶，破坏植物组织。受害植株主要症状是呈萎蔫状态，植株的柔软部分受病初期呈水浸透明状，渐次变为褐色和黑色，并腐烂而流出粘稠汁液，病部有臭味。植株较坚硬部分受病后先呈褐色，渐次腐烂。在田
水稻云形病是山稻格氏霉侵染引起的真菌病害，主要发生在长江中下游稻区，是杂交稻和常规中籼稻后期重要病害之一。 [诊断]该病主要危害叶片，从下部叶片开始发病，逐渐向上蔓延，叶片受害后一般从叶尖或叶缘开始产生水渍状小斑，后迅速向下部扩展，病斑呈灰褐色和暗褐色相交的波浪状云纹，病健交界处明显，高湿时叶片病部呈水渍状腐烂，病斑上产生白色粉状物(分生孢子梗和分生孢子)，后期产生许多褐色小点(子囊壳)。 [发病规律]病菌以菌丝体在病叶和病种上越冬，翌年产生分生孢子，通常在水稻
分布及为害症状：分布于全国各产茶区，但在华北和华东发生较普遍。此病主要发生于苗期及成株期，为害根部或根颈部，先是须根腐烂，呈褐色或黑褐色，然后蔓延到侧根，腐烂后呈紫褐色，病斑表面布满紫褐色丝状物，病根表面上有半球形的颗粒状茵核小茎基部加厘米硝常被紫红色的苗丝包围，质地柔软；易剥落，根部皮层也易剥落，严重时地上部分萎蔫，新梢发芽减少，病株枯死。 发生时期及流行条件：一般在高温多雨的春夏之交或夏秋之交发病较重，凡地下水位高、排水不良、土壤过度干燥的茶园易发病。此病菌可在土壤中存活多年
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