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- XK-SJH-3225
- 2025年11月07日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
61
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 检测范围：
详询
- 检测方法：
酶联免疫
- 应用：
科研
- 适应物种：
人
- 标记物：
HRP(辣根过氧化物酶)
- 样本：
血清、血浆、组织液等液体样本
- 规格：
48T/96T
检测范围： 96T
2.5ng/L-80ng/L
使用目的：
本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中高尔基蛋白73(GP-73)含量。
试剂盒组成
| 1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1瓶 |
| 2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 标准品（160ng/L） | 0.5ml×1瓶 |
| 3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 |
| 4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 | 1份 |
| 5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2张 |
| 6 | 显色剂B液 | 6ml×1瓶 | 12 | 密封袋 | 1个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
人高尔基蛋白73(GP-73)ELISA检测试剂盒操作步骤
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
| 80ng/L | 5号标准品 | 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 40ng/L | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 20ng/L | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 10ng/L | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 5ng/L | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
操作程序总结：
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
人高尔基蛋白73(GP-73)ELISA检测试剂盒注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
人高尔基蛋白73(GP-73)ELISA检测试剂盒保存条件及有效期
1.保存：2-8℃。
2.有效期：6个月
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文献和实验70% 的结直肠癌患者优先向肝脏转移（CRLM），且这些患者的预后较差，肝转移是这些患者死亡的主要原因。外泌体是细胞分泌的具有脂质双层膜的纳米囊泡。肿瘤来源的外泌体可介导肿瘤-间质通讯和转移前生态位的形成，并通过调节分子向靶细胞的水平转移来促进肿瘤进展、侵袭和转移。GP73 是一种高尔基体膜蛋白，其作用是通过调节上皮-间质转化（Epithelial-Mesenchymal Transition，EMT）相关因子的转运来调节癌症的转移。研究表明 GP73 与 MVBs 重叠，并通过其胆固醇结合
以下操作按照天根产品 DP305 植物基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 植物叶片 研钵 液氮2. 无水乙醇 巯基乙醇3. 移液器及配套无菌枪头（10 μl， 200 μl ，1ml），1.5 ml离心管4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，实验准备-试剂盒准备1：使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。实验准备-试剂盒准备2：准备实验时，将缓冲
一年内两次叫停！康方CD73单抗又“悬”了，PD-1的黄金搭档还香吗？
’-Nucleotidase)，是由NT5E基因编码的一种细胞表面，是催化AMP形成胞外腺苷的主要酶 [1]。人CD73的基因位于染色体6q14-921。CD73的进化相当保守，人CD73的cDNA序列与鼠的cDNA序列有86%的同源性 [2]。人CD73前体蛋白由574个氨基酸残基组成。CD73分子N末端第1-26位氨基酸残基及C末端第550-574位氨基酸残基被剪切后，第27-549位氨基酸残基序列即为成熟CD73，形成1个分子量约为70 kDa亚单位，由两个亚单位构成具有生物活性的同质二聚体，亚基间通过非共价键连接
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