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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
209
- 适应物种:
人/动物/植物等
- 应用:
用于科研试剂实验
- 检测方法:
elisa法
- 检测范围:
科研试剂
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
48T/96T
应用及保存人端粒重复序列结合因子1(TERF1)ELISA试剂盒小提示:
1、样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染。
2、冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。
3、标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时,应离心沉淀后取上清检测。
4、血清标本如是以无菌操作分离,则可以在2~8℃下保存一周,如为有菌操作,则建议冰冻保存。
5、要注意避免出现严重溶血。
人端粒重复序列结合因子1(TERF1)ELISA试剂盒标准曲线做不的原因分析:
A、刚加完显色剂时梯度明显,显色液可能是从高浓度向低浓度孔加的。
B、酶浓度太高,导致后显色结果都是高的。
C、包被:酶标系统不匹配或者酶标的非特异反应太强,或者酶标仪读数范围不够。
D、样本中有能够催化底物的物质,没洗下来。
建议:包被、酶标重新做梯度,先用较低的浓度把梯度摸索,然后再优化灵敏度,后调出所需的灵敏度、线性范围。
建议:有条件的话,可以把酶免的蛋白系统移植到板式化学发光上,加完底物三分钟读数。
建议:蛋白系统灵敏度够的话,显色十分钟就差不多了。
建议:酶是自己标的这种情况的,HRP比例不要太高。
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文献和实验,准确、重复性好。快速,6-8小时得到结果。现介绍如下:1.原理:本法是建立在Kim等人描述的TRAP方法的基础上的,它将端粒酶介导的衍生产物进行PCR扩增,并与后序的ELISA法结合在一起。本法可分如下几步:(1)延伸/扩增:第一步:端粒酶将端粒重复序列(TTAGGG)加到带有生物素标记的P1-TA引物的3’末端。第二步:利用引物P1-TS和T2通过PCR扩增这些延伸出的产物,产生出的PCR产物带有特异的端粒酶-6-核苷酸的延伸产物。(2)ELISA测定:PCR产物变性后与Dig标记的端粒特异
20 世纪 80 年代中期,科学家们发现了端粒酶(Telomerase)。端粒酶是一种特殊的逆转录酶,由 RNA 和蛋白质组成,是以自身 RNA 为模板,合成端粒重复序列,加到新合成的 DNA 链末端,负责端粒的延长。端粒酶可以把 DNA 复制损失的端粒填补起来,藉由把端粒修复延长,可以让端粒不会因细胞分裂而有所损耗,使细胞分裂的次数增加。 2009 年,诺贝尔医学奖获得者发现端粒和端粒酶可以保护染色体,让研究人员能够更清楚地了解癌症和老化的过程,解决了生物学上的一个重大
的寡核苷酸底物,分别与底物及端粒重复序列配对的引物。如果待测样本中含有端粒酶活性,就能在底物上接上不同个数的6碱基(GGTTAG)端粒重复序列,通过PCR反应,产物电泳检测就可观察到相差六个碱基的DNA Ladder现象(参见图4)。此外,Intergen公司还提供用酶联免疫法(ELISA)检测的试剂盒. 同样,这种检测方法也不专对细胞凋亡,检测结果也不纯反应细胞凋亡的发生。
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