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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
199
- 英文名:
RIPA Lysis Buffer For Co-IP/IP
- 保质期:
2年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
置于RT阴凉处,可
- 规格:
100ml
特别提示:包括RIPA裂解缓冲液(Co-IP/IP)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:RIPA裂解缓冲液(Co-IP/IP)
英文名称:RIPA Lysis Buffer For Co-IP/IP
产品货号:MT0065
产品规格:100ml
对目的蛋白进行检测分析时,总蛋白的提取至关重要,如蛋白提取不好会导致后续试验的不理想甚至失败,如:信号极弱或无杂交信号、背景高、非特异性条带多等.根据目标蛋白的类型和实验应用种类来选择合适的RIPA裂解液,才能zuì大程度地保证后续实验的成功。Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer对细胞有一定的裂解能力,能获得较多的胞浆蛋白,而对细胞核的裂解能力有限,不能完全裂解细胞核,因此获得的总蛋白适用于IP或CO-IP实验。
产品特点:
1.可很好的释放胞浆蛋白,部分释放膜蛋白和核蛋白。
2.经Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer,核蛋白与DNA还紧密结合在一起,离心后会造成核蛋白的丢失。
3.对于膜蛋白,Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer的破坏力小,不能使膜蛋白与膜充分分离,故离心后造成膜蛋白的丢失。
图:用Western Blot RIPA Lysis Buffer(货号:MT0066)和Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer(货号:MT0065)分别提取核蛋白PPARγ和膜蛋白PLD-1,上样量分别为40μg和10μg总蛋白,ECL发光液显色。A/C泳道为Western Blot RIPA Lysis Buffer,B/D泳道为Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer。由此图比较分析表明Western Blot RIPA Lysis Buffer能更充分的释放核蛋白和膜蛋白,从而获得更强的信号。
储存条件:置于室温阴凉处,可保存2年。
我公司销售的RIPA裂解缓冲液(Co-IP/IP)北京厂家,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验或者互作蛋白复合物(红色+黄色)洗脱 Step 5:分析检测—Western Blot 或者质谱 常用“黑话” 以上示例图证明了 EDR1 和 EDR4 有相互作用。如果想要设计好实验,先清楚以下常用“黑话”含义。 阳性对照:证实细胞裂解物中确实存在靶蛋白(IP)或者互作蛋白对(co-IP,比如诱饵蛋白X和靶蛋白 Y),即为常说的 input。可直接取抽好的蛋白溶液进行 Western。 阴性对照:用来排除假阳性。IP/co-IP 后靶蛋白或者互作蛋白对都检测到了,固然是值得高兴
—— co-IP 检测 Hsp90 与 Cdc37 结合情况1、实验材料SKBR3 细胞,PMSF(Amresco,cat:329-98-6),cocktail(上海晶莱生物),脱脂奶粉(cat:66196131T),β-actin(上海晶莱生物)。Anti-Hsp90(santa,cat:sc-69703)、Anti-Cdc37(santa,cat:sc-13129)、Protein A+G agrose(Beyotime),细胞刮,4 度离心机(eppendorf,centrifuge
一文搞懂Co-IP、Pull-down、SPR、FRET…原理及选择标准
” Co-IP是蛋白互作研究中最常用的方法之一。利用针对bait蛋白的抗体将其从细胞或组织裂解液中沉淀下来,再通过Western blot检测prey蛋白是否一起被拉下。 它的优势是保留了较多细胞内蛋白复合物信息,适合验证已有互作假设,也能用于内源蛋白互作检测。 但Co-IP阳性只能说明两个蛋白存在于同一复合物中。A和B之间可能直接结合,也可能通过蛋白C连接。因此,如果后续要证明“直接物理结合”,还需要Pull-down、SPR等实验补充。 Co-IP还比较容易受裂解液、去垢剂、盐浓度和洗涤强度影响。互作
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