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大量
- 英文名:
PNGase F
- 保质期:
有效期12个月
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
15000U
产品信息
产品描述
N-糖苷酶 F (PNGase F)是一种酰胺水解酶,经过和平空间站伊丽莎菌克隆,主要由脑膜炎脓杆菌等革兰氏阴性菌分泌。并在 E. coli大肠杆菌中重组表达,可以裂解由天冬酰胺连接的高甘露糖、杂合和复杂的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位点为糖蛋白内侧N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨残基之间的酰胺键,同时将酶解后蛋白上的天冬氨酰转化为天冬氨酸。本产品常应用于抗体及其相关蛋白完全去糖基化。
产品性质
产品组分
运输和保存方法
干冰运输;-20℃保存;有效期12个月。
使用方法
1、变性条件下蛋白质去糖基化:
1)在水中加入1 μL Buffer 1和目标糖蛋白(1-20 μg),至终体积10 μL;
2)100℃温度下煮沸10 min使其变性,冰上冷却,离心10秒;
3)加入2 μL的Buffer 2、2 μL的10%NP-40、6 μL去离子水,总反应体积20μL;
4)加入2 μL的PNGase,轻轻混匀。在37℃孵育1-3 h。
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
| PNGase F (N-糖酰胺酶F或肽N-糖苷酶 F) | 20411ES01 | 15000 U | 763.00 |
| 20411ES02 | 75000 U | 3373.00 |
产品描述
N-糖苷酶 F (PNGase F)是一种酰胺水解酶,经过和平空间站伊丽莎菌克隆,主要由脑膜炎脓杆菌等革兰氏阴性菌分泌。并在 E. coli大肠杆菌中重组表达,可以裂解由天冬酰胺连接的高甘露糖、杂合和复杂的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位点为糖蛋白内侧N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨残基之间的酰胺键,同时将酶解后蛋白上的天冬氨酰转化为天冬氨酸。本产品常应用于抗体及其相关蛋白完全去糖基化。
产品性质
| 中文别名(Chinese synonym) | N-糖酰胺酶F;N-糖苷酶 F |
| 英文别名(English synonym) | PNGase F |
| 来源(Source) | 大肠杆菌表达 |
| 分子量(Molecular weight) | 48.4 kDa |
| 比活性(Specific activity) | 50000 U/mL |
| 缓冲液组分(Buffer) | 20 mM Tris-HCl pH 7.5, 50 mM NaCl, 5 mM EDTA,50%Glycerol |
| 酶活定义(Unit Definition) | 1个酶活力单位指在10 μL的反应体系中,37℃条件下1小时从10 μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。 |
产品组分
| 编号 | 组分名称 | 组分成分 | 产品货号/规格 | |
| 20411ES01 | 20411ES02 | |||
| 20411-A | PNGase F | PNGase F | 15000 U | 75000 U |
| 20411-B1 | Buffer 1(10×) | 5% SDS; 400 mM DTT | 150 μL | 750 μL |
| 20411-B2 | Buffer 2(10×) | 200 mM Tris, PH 7.5 | 300 μL | 1500 μL |
| 20411-B3 | 10% NP-40 | 10% NP-40 in MilliQ-H2O | 300 μL | 1500 μL |
运输和保存方法
干冰运输;-20℃保存;有效期12个月。
使用方法
1、变性条件下蛋白质去糖基化:
1)在水中加入1 μL Buffer 1和目标糖蛋白(1-20 μg),至终体积10 μL;
2)100℃温度下煮沸10 min使其变性,冰上冷却,离心10秒;
3)加入2 μL的Buffer 2、2 μL的10%NP-40、6 μL去离子水,总反应体积20μL;
4)加入2 μL的PNGase,轻轻混匀。在37℃孵育1-3 h。
2、非变性条件下蛋白质去糖基化:
1)在水中加入2 μL的Buffer 2和目标糖蛋白(1-20 μg)至最终体积为 20 μL。
2)加入 2~5 μL 的 PNGase F, 轻轻混匀。
3)37°C 孵育 4-24 h。
注意:在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化,在非变性条件下可能需要增加PNGase F的量和延长孵育时间。
注意事项
1、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2、本产品仅作科研用途!
HB221031
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文献和实验该产品被引用文献
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[2] Miao Z, Cao Q, Liao R, et al. Elevated transcription and glycosylation of B3GNT5 promotes breast cancer aggressiveness. J Exp Clin Cancer Res. 2022;41(1):169. Published 2022 May 7. doi:10.1186/s13046-022-02375-5(IF:11.161)
[3] Huang Z, Yang P, Wang F. Shrimp Plasma CREG Is a Hemocyte Activation Factor. Front Immunol. 2021;12:707770. Published 2021 Aug 16. doi:10.3389/fimmu.2021.707770(IF:7.561)
[4] Xu X, Xiang T, Song S, et al. Secretory expression and purification of recombinant PLA2R epitopes for the detection of anti-PLA2R autoantibody in serum. Analyst. 2022;147(5):965-974. Published 2022 Feb 28. doi:10.1039/d2an00094f(IF:4.616)
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[4] Xu X, Xiang T, Song S, et al. Secretory expression and purification of recombinant PLA2R epitopes for the detection of anti-PLA2R autoantibody in serum. Analyst. 2022;147(5):965-974. Published 2022 Feb 28. doi:10.1039/d2an00094f(IF:4.616)
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