MS ZBTB46 PE U4-1374 50UG

流式细胞分析分选术

-20oC 冰箱，保存。 2.6 上机样本制备 从-20oC 取出细胞样本(至少已在-20oC 放置4 小时)，离心(300g，5min)收集细 胞，弃上清。1×PBS 清洗两遍，加入100ul 1×PBS，votex 混匀，加入10ulPI(终 浓度100ug/ml)，10ulRnase(终浓度50ug/ml)，置于37oC 水浴锅，避光处理30min。 注：细胞量较多时，PI 及RNase 量应酌量增加。 2.7 上机 在cellquest 环境下，选择FL

cDNA文库组标准流程

Superscipt II―RT，混匀; 7. 42℃反应50分钟，然后70℃，15分钟灭活反转录酶. 二、 cDNA 第二链的合成 : 1. 第一链反应完成后，取2μl一链产物－20℃冰箱中保存，待电泳检测。其余的产物合并，混匀，然后顺序加入下列试剂(promega): 20μl   10×DNA Polymerase I buffer 6μl    10mM dNTP(自己配制) xμl    dd H2O 1μl    RNase H(2U/μl) 10μl   DNA Polymerase

细胞凋亡的检测方法

。 （7）加入0.25％ NP-40溶液3μl，1mg/ml RNase A溶液3μl，37℃，30min。 （8）加入3μl蛋白酶K，37℃，30min。 （9）加入12μl样品稀释液，含溴化乙锭的1.5％琼脂糖电泳，观察 2、琼脂糖凝胶电泳的定量检测 方法一：简易末端标记法 （1）按常规提取细胞DNA。 （2）在0.5ml的EP管中加入细胞DNA，反应体系如下：细胞DNA 0.5～1.0μg，10×缓冲液2μl，32P-dATP（或-dCTP）0.5μCi，Klenow聚合酶5U，双蒸水加