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- 百奥莱博
- SV0975-NUQ
- 北京
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
493
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-80℃
- 规格：
20次
特别提示：包括PCR 克隆试剂盒（无感受态细胞）在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：PCR 克隆试剂盒（无感受态细胞）
产品货号：SV0975
产品规格：20次
特性:
单克隆所有类型的 PCR 产物更为简单，包括平末端和 TA 末端
克隆速度快，连接仅需 5 分钟
筛选简单，几乎没有克隆背景，不需要蓝白斑筛选
无需纯化步骤，节约时间
两侧的限制性内切酶酶切位点方便亚克隆，包含两种单酶切选择
概述:
我公司PCR试剂盒提供:优化的 2X 克隆预混液（其中配有独特的连接增强剂）和线性载体。该线性载体利用zuì新技术抑制背景菌落生长，使背景值降为zuì低。本试剂盒能简单、快速克隆各种 PCR 产物。具有校读功能的聚合酶产生平末端扩增子（如:Q5 或者 Phusion），无校对功能的聚合酶产生单碱基突出末端的扩增子（如Taq、OneTaq、LongAmp Taq)。2X 克隆预混液中包含有末端修复成份，可在连接反应步骤前进行末端平齐化，因此，无论扩增子是何种末端都能完成有效连接。此外，使用本试剂盒，PCR 产物无需纯化，PCR 引物也无需经过 5´ -磷酸基修饰。
●提供下游菌落 PCR 或测序引物
●试剂盒包含 1 kb 扩增子对照和线性载体及一次用量的大肠杆菌感受态细胞
●比其它商业化产品保质期长（12 个月）
PCR 克隆试剂盒包含:
– 克隆预混液
– 线性化 pMiniT™ 载体
– 对照扩增子
– 克隆检测正向引物
– 克隆检测反向引物
– 我公司10-beta E. coli 感受态细胞（克隆级）(仅在 E1202 提供)
质保声明:
我公司PCR 克隆试剂盒经过严格的质控检测，确保该产品具有zuì高的活性和纯度。
我公司销售的PCR 克隆试剂盒（无感受态细胞）报价，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验性酶切。 除了制备插入片段，PCR 也是一种在在克隆后筛选克隆是否携带目标插入片段的有效方法。引物经过设计，可以用于确定载体中插入片段是否存在和插入方向。 4.突变 PCR 克隆的一大优点是能够通过克隆将所需突变引入目的基因中，以便进行突变研究。在定点突变中，经过设计的 PCR 引物可将碱基置换、删除或插入整合到特定序列中。如图 5所示，引物定位到已克隆至质粒中的序列上。随后，含有引入突变的 PCR 产物通过自我连接，重新生成环状质粒，并用于转化感受态细胞。 图 5.PCR 用于定点突变。该方法使用非重叠
） 利用Taq聚合酶同时具有的末端连接酶的功能，在每条PCR 扩增产物的3`端自动添加一个3`-A突出端。Invitrogen公司TA克隆 系统和Topo TA克隆 系统都提供一个线性含3`-T突出端的载体用于直接高效地连接PCR 产物。系统中也包含感受态细胞和S.O.C培养基, 使得实验操作更为简单方便。 所以TA克隆 不需使用含限制酶序列的引物，不需将PCR 产物进行优化，不需把PCR 产物做平端处理（Invitrogen另有平端载体供高确
（如果用玻璃棒涂抹，酒精灯烧过后稍微凉一下再用，不要过烫）。(2) 菌液完全被培养基吸收后，倒置培养皿，于37℃恒温培养箱内培养过夜(12-16小时)，待菌落生长良好而又未互相重叠时停止培养，对于可以蓝白斑筛选的质粒和菌株来说，此时应该能清楚地看到蓝色和白色菌落。用 CaCl2法制备的感受态细胞，可使每微克超螺旋质粒 DNA产生5×106-2×107个转化菌落。在实际工作中，每微克有105以上的转化菌落足以满足一般的克隆实验。4) 检出转化体和计算转化率各实验组在培养皿内菌落生长状况及结果分析转化
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