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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
447
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温
- 规格:
1包
特别提示:包括PVDF膜(进口分装),0.45μm,13.5cm×10cm,10张/包在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:PVDF膜(进口分装),0.45μm,13.5cm×10cm,10张/包
产品货号:ZN1896
产品规格:1包
产品规格:0.45μm 13.5cm×10cm/张 10 张/包
产品保存:室温干燥保存,一年有效。
产品简介:0.45μm的PVDF 膜主要用于(>20KD〕免疫印迹,吸附分析、氨基酸分析、N 端蛋白质测序、Dot/Slot blotting、糖蛋白显色和脂多糖分析。膜与湿式和半干式电印迹系统兼容。
注意事项:
1.凝胶电泳后,将胶在转移缓冲液中平衡 10分钟(对于厚度大于 0.75mm的凝胶,20分钟)。
2.将平衡的凝胶与湿膜直接接触,去除凝胶和膜之间可能形成的气泡。
3.将膜/凝胶三明治放入电印迹装置中。根据您的具体应用进行印迹程序。
4.为了增强膜与高分子量蛋白质的结合,延长转移时间并在转移缓冲液中加入低浓度的SDS(<0.01%w/ v)。
5.膜转印完之后如需要染色剂染色,需要用*醇浸润 15 秒之后再染色。
需要材料:
1.膜切割成凝胶的尺寸
2.*醇润湿干膜
3.纯水
4.转移缓冲液:用于湿转的25mM Tris,192mM 甘氨酸,pH8.3,10%*醇或用于半干转移的48mMTris,39mM 甘氨酸,pH9.2,10%*醇
5.将滤纸片切割成凝胶的尺寸并浸泡在转印缓冲液中至少 30 秒
6.含有 0.5-5%(w/ v)(牛血清白蛋白,酪蛋白,脱脂奶粉)的封闭液
7.洗涤缓冲液:含有 0.05-0.1%Tween-20的PBS或TBS
PBS:10mM 磷酸钠,pH7.2,0.9%NaCl
TBS:10mM Tris,pH7.4,0.9%NaCl
8.在封闭缓冲液或洗涤缓冲液中稀释的一抗
9.在封闭缓冲液或洗涤缓冲液中稀释的酶标二抗
使用说明:
1.将膜置于*醇中 15 秒。当膜潮湿时,膜将从不透明的白色变成均匀,半透明的灰色。
2.将膜浸入水中 1-2分钟以置换*醇。如果膜漂浮在水面上,用镊子将其推入水中,直到它被淹没。
3.将膜浸泡在转移缓冲液中 5分钟以置换水。膜已经可以用于转印。
免疫检测:
1.如果印迹膜干燥,用*醇将其再湿润 15 秒,直到它从不透明的白色变成半透明的灰色。
2.用纯水洗1分钟。
3.将印迹膜置于封闭缓冲液中,温和搅拌孵育1 小时。在洗涤或封闭缓冲液中制备一抗溶液。
4.将印迹膜置于稀释的一抗溶液中,温和搅拌孵育1 小时。
5.用洗涤缓冲液洗3-5次,每次 5分钟。在洗涤或封闭缓冲液中制备二抗溶液。
6.将印迹膜置于稀释的二抗溶液中,温和搅拌孵育1 小时。
7.用洗涤缓冲液洗3-5次,每次 5分钟。
8.化学发光检测法进行显色,在显色剂中温育 1-5分钟,使印迹膜暴露于 X 射线胶片或使用化学发光成像系统。
膜的存储:
如果膜在蛋白质转移后不立即使用,膜可以干燥保存,而没有任何性能损失。
1.将膜放在滤纸上,室温下晾干 1-2 小时。
2.用保鲜膜覆盖膜,并保存在阴凉的地方。
3.在继续使用膜之前,使用以下方法之一重新润湿膜:
A.将膜置于 100%*醇中,用水清洗,然后再用于后续实验。
B.将膜直接放入至少含有 50%*醇的染色溶液中。
相容的染色剂:
1.考马斯亮蓝染色剂 2.酰胺黑 3.印度墨水 4.丽春红 5.胶体金和 CPT 6.甲**蓝
除了PVDF膜(进口分装),0.45μm,13.5cm×10cm,10张/包,,我公司还供应以下相关产品:
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文献和实验别的是蛋白上连续的几个氨基酸,也就是线性表位,那么这种抗体可同时用于免疫组化和 Western,而如果抗体识别构象形表位,则只能用于免疫组化。一般抗体说明书上都有注明此种抗体识别的氨基酸区间。(限于单抗)W. Western Blot 中抗体的重复应用问题解答:抗体工作溶液一般不主张储存反复使用,但是如抗体比较珍贵,可反复使用2-3次。稀释后应在2-3天内使用,4度保存,避免反复冻融。4. 滤纸、胶和膜的问题X. NC膜\ PVDF膜\ 尼龙膜怎样鉴别?解答:尼龙膜是较理想的核酸固相支持物,有多种
斯亮兰染色否可以ECL检测稍差可以快速免疫检测否可以SDS存在下蛋白质结合差好质谱分析否可以(尼龙膜和NC膜的特点相似,主要用于核酸杂交)b)膜的大小: 请根据胶的面积来确定.c)膜的孔径: 0.45μm适用一般蛋白质.0.2μm适用小分子蛋白质.购买信息:66485硝酸纤维素膜,0.45um,30cmX3m/卷美国Gelman1395元/卷 硝酸纤维素膜,0.45um,20cmX20cm美国Gelman80元/张 硝酸纤维素膜,0.45um,20cmX20cm国产30元/张60207尼龙
4. 滤纸、胶和膜的问题 X. NC膜\ PVDF膜\ 尼龙膜怎样鉴别? 解答:尼龙膜是较理想的核酸固相支持物,有多种类型;硝酸纤维素膜是目前应用最广的一种固相支持物,价格最便宜;PVDF膜介于二者之间。 就结合能力而言:尼龙膜结合DNA和RNA能力可达480-600μg/cm2,可结合短至10bp的核酸片段;硝酸纤维素膜结合DNA和RNA能力可达80-100μg/cm2,对于200bp的核酸片段结合能力不强;PVDF膜结合DNA和RNA能力可达125-300
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