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58
- 英文名:
T4 DNA Ligase
- CAS号:
9015-85-4
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海莼试
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2~8℃,避光,避免与金属接触
T4DNA连接酶9015-85-4说明书价格实惠,性价比高,口碑良好,经过了多重检测程序,请客户放心购买,了解更多详情请点击这里获取。
〖产品名称〗 T4DNA连接酶9015-85-4说明书
〖规格〗BR
〖包装〗1KU
英文名称:T4 DNA Ligase
CAS号:9015-85-4
分子量:55.3kDa,单体
级别:BR
来源:含有T4噬菌体克隆基因30的大肠杆菌
活性定义:是指在ATP-PPi交换反应中,37℃、30分钟内将1nmol 〖32PPi〗转换为Norit可吸收形式所需的酶量(weiss单位,1个weiss单位相当于约200个粘性末端连接单位。1个粘性末端连接单位:20ul反应体系(50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端)中,在16℃、30分钟内连接50%连接HindIII酶切的Lambda DNA 产物所需的酶量)
抑制剂:当反应体系中NaC1或KC1的浓度超过200 mM时,可强烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活:65℃加热10分钟或70℃加热5分钟
注意:T4 DNA Ligase与DNA结合会改变条带的琼脂糖凝胶电泳迁移率,为避免此现象,电泳前需处理样本或分子量标准。样本处理如下:样本与Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液(#R1151)混合,75℃加热5分钟或65℃加热10分钟后冰浴保存;转化时,连接产物的体积不得超过感受态细胞体积中的10%;电转化之前,先用仿抽提方法除去连接混合物中的T4 DNA Ligase,然后经乙沉淀纯化抽提产物
质量控制:测试表明无内切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、酶污染。功能检测:粘性末端或平末端DNA的连接能力
性状(以下信息仅供参考):液体。该酶催化双链DNA或RNA中毗邻的5'基团和3'-羟基末端之间形成二酯键,还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA复合体中的单链切口,连接DNA的粘性和平末端,但该酶对单链核酸无酶活性。该酶需要辅因子ATP
用途:本品仅供科研,不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)粘性末端或平末端双链DNA的连接;双链寡核苷酸接头与双链DNA连接;双链DNA、RNA或DNA-RNA复合体中缺口的修复;连接酶介导的RNA检测;位点特异性突变;扩增片段长度多态性
保存: -20°C
| 产品名称 | 英文名称 | 包装 |
| T4DNA连接酶9015-85-4说明书 | T4 DNA Ligase | 可根据客户要求订制 |
公司承诺:
1、T4DNA连接酶9015-85-4说明书发货迅速,关于运费、快递、物流按客户需求发货。
2、质优价廉,欢迎订购,量大可享受价格优惠服务。
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产品规格:
T4DNA连接酶9015-85-4说明书 GR:优级纯。主成份含量很高、纯度很高,适用于精确分析和研究工作,有的可作为基准物质.
AR:分析纯。主成份含量很高、纯度较高,干扰杂质很低,适用于工业分析及化学实验。
CP:化学纯。主成份含量高、纯度较高,存在干扰杂质,适用于化学实验和合成制备。
LR:实验纯。主成份含量高、纯度较差,杂质含量不做选择,只适用于一般化学实验和合成制备。
BR:生化试剂。用于配制生物化学检验试液,和生化合成。质量指标注重生物活性杂质。可替代指示剂和有机合成。
BS:生物染色剂。适用于配制生物标本染色液。质量指标注重生物活性杂质。可替代指示剂和有机合成。
Ind:显色剂。
HPLC:适用于高压液相色谱的试剂。
混成单一试剂的问题
比如酶法肌酐试剂,第一步R1中的酶要消除样品中内源性肌酸的干扰,如果混成单一试剂,则会使检测结果偏高,消除法HDL、LDL也不能混成单一试剂,因为它们都要分别清除HDL和LDL以外的脂蛋白,从而达到检测的目的,如果混成单一试剂,则会使测定的HDL和LDL不准确。另外,有的试剂混成单一试剂后,稳定性和抗干扰能力也会明显下降。解决办法:①在仪器通道或试剂位允许的情况下尽量使用双试剂;②如一定要使用单一试剂,最好选择试剂针对部份项目专门好的单一试剂。
开瓶的问题:
随着全自动生化分析仪的普及,“开瓶稳定性”也随之受到了大家的重视,但是就目前有的试剂方法学来讲,还达不到人们所要求的试剂开瓶后在仪器内放很长时间不需要定标,比如ALP、TP、GSP等PH为碱性的试剂,开瓶后试剂会吸收空气中的二氧化碳,使试剂本身的PH值下降,如果长时间开瓶不定标或校准,会使检测结果发生偏离,在国外有的项目有明文规定,必须72小时之内定标,比如BUN。但是在国内的某些实验室为了方便,很长时间都不作校准,导致测定结果的不准确。解决办法:了解试剂的特性,及时对部份项目进行校准,对于每天标本量不多的医院,可按1~2天的用量取用试剂放入仪器。
使用生物试剂时需注意:
(1)切忌与肌肤直接接触,以防遭受腐蚀性伤害。
(2)提取试剂时要用洁净的药勺,量筒或滴管,严格按照一样器具取一样试剂的原则,取完一种试剂后,应将工具洗净(药勺要擦干)后,才可取用另一种试剂。
(3)取用完毕后一定要盖紧瓶塞,不可放错瓶盖和滴管,用完后请及时将瓶子放回原处,以免遗忘造成不便。
(4)已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内,以防止原试剂的再次污染。
移液器架(通用茶色) 个 M17琼脂/M17 Agar牛奶和制品中酸菌检测和分离培养250克国产/进口
Theobromine 可可 20mg MDA-MB-231(ATCC来源), 人腺细胞
多舌飞蓬苷;6’-O-Caffeoyle 规格: 20mg 订购|咨询 缓冲蛋白胨水(缓冲胨水增菌液) (BPW) 规格: 250g 用途: 用于沙门氏菌、阪崎肠杆菌的前增菌培养
3-氯-1-丁炔(>98.0%(GC)) 质量规格:>98.0%(GC) 3-Chloro-1-butyne ELISA Kit for Human Mast cell carboxypeptidase A 7.8-500 pg/mL
5-羟色酸(5-HTP) 质量规格:>98%,混旋 5-Hydroxytryptophan 麦角甾苷规格:
梭菌蛋白酶 质量规格:酶活:>50U/mg,进分 Clostripain RNF6 环指蛋白6抗体 0.2ml
哈西奈德 含量测定 进口/国产 常温,避光 规格: 50mg Rabbit Anti-Guinea pig IgG/FITC FITC标记的兔抗豚鼠IgG 0.3ml
洋艾素;艾苦素 英文名称:Absinthin; absinthin 保存:-20℃ 规格:HPLC≥98% 20mg/支 ELISA Kit for Human Pancreatic prohormone 46.9-3000 pg/mL
胍 进口/国产 500毫克 大鼠果糖二酸醛缩酶C(ALDOC)ELISA试剂盒 英文名: ALDOC ELISA Kit
厚朴订购|咨询规格:HPLC≥98%;20mg UBE2A/UBE2B/RAD6 泛素结合酶E2蛋白A抗体 0.2ml
千金子二萜二苯酰酯;Euphor订购|咨询规格:20mg MUG培养基 MUG Medium 100g
叔丁基对;纯品型;标准品-TBHQ 规格: 0.25g 订购|咨询 小鼠ⅡD组脂酶A2(PLA2G2D)ELISA试剂盒 英文名: PLA2G2D ELISA Kit
无水酸二钠 规格: 50mg 订购|咨询 MTA1 肿瘤转移相关蛋白1抗体 0.2ml
水杨酸酯 规格: HPLC≥98%;1ml 订购|咨询 小鼠蛋白激酶Cδ(PKCδ)ELISA试剂盒 英文名: PKCδ ELISA Kit
苦蒿素 规格: 20mg 订购|咨询 HA标签免疫亲和介质小鼠单核巨噬细胞白血病细胞
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文献和实验相关专题 重组DNA技术工具酶 T4 DNA Ligase即T4 DNA连接 酶,可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合,该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
因为看到园子中使用NEB T4 DNA连接酶的老师和同学比较多,也经常就一些连接的问题进行讨论和沟通。今天发一个关于NEB T4 DNA连接酶的一个专题,就使用过程中一些常见问题跟大家讨论一下。也希望各位老师同学能够踊跃参与,如果大家有什么疑问或者好的建议欢迎。 一、关于NEB M0202 T4 DNA 连接酶的使用方法和常见问题及解答 1、产品特性和使用方法 产品说明:该酶催化契合的双链DNA或RNA的5'-磷酸末端和3'-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平滑
了一下,小提了质粒,做了酶切。(Kpn I和EcoR I是我的引物上带的位点) 酶切鉴定完了之后,从6号和7号克隆菌液中各取了1 ml送测序。结果6号有两个位点突变,还少了一小段,7号正确,算是运气比较好吧。接下来的操作,论坛上已经有很多大佬说过了,到了这一步之后,可能后面遇到的主要问题就是连接。Takara的T4连接酶说明书上说,载体与目的片段分别是0.03 pmol和0.3 pmol,也就是1:10。我一般就是按照说明书做的,效果也还行。但是,我做的片段都比较短,可能大片段的话要调整比例
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