Stbl2化学感受态细胞北京厂家

特别提示：包括Stbl2化学感受态细胞在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Stbl2化学感受态细胞
英文名称：Stbl2 Chemically Competent Cell
产品货号：MQ0011
产品规格：10×100μl/50×100μl

Stbl2菌株来源于JM109 E.coli strain，适合克隆不稳定插入片段(正向重复序列，逆转录病毒序列等)；mcr A突变和mcr BC-hsdRMS-mrr deletion使该菌株更适于克隆甲基化的基因组序列；同时Stbl2也可用于慢病毒载体的构建。
recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。不存在lacIqZΔM15，不可用于蓝、白斑筛选。
Stbl2感受态细胞经特殊工艺制作，经pUC19检测转化效率可达109 cfu/μgDNA。
保存条件：-80℃
基因型：
F-mcrAΔ(mcrBC-hsdRMS-mrr)recA1 endA1lon gyrA96 thi supE44 relA1λ-Δ(lac-proAB)
操作说明：
1.Stbl2感受态细胞放置冰中融化(或放手心或室温片刻，待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中)，加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀，冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.培养基，使用其他培养基会降低转化效率。
4.30℃，225 rpm复苏90分钟。(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control PUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟。)
5.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C.培养基上。
6.将平板倒置放于30℃培养箱过夜培养。(若转化control PUC19计算转化效率，则需37℃培养过夜)
注意事项：
1.感受态细胞zuì好在冰上融化。
2.混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少zuì终用于涂板的菌量。

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