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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
289
- 英文名:
T1 Chemically Competent Cell
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-80℃
- 规格:
20×100μl/100×100μl
特别提示:包括T1化学感受态细胞在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:T1化学感受态细胞
英文名称:T1 Chemically Competent Cell
产品货号:MQ0005
产品规格:20×100μl/100×100μl
T1感受态细胞是目前生长速度较快的感受态细胞,在平板上8h可见克隆,可用于构建克隆,蓝白斑筛选等实验;经pUC19质粒检测转化效率可达1×109cfu/μg。
保存条件:-80℃
基因型:
F-φ80(lac Z)ΔM15 ΔlacX74 hsdR(rK-mK+)ΔrecA1398 endA1 tonA
操作说明:
1.取100μl冰上融化的T1感受态细胞,加入目的DNA(质粒或连接产物)并轻轻混匀,冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项:
1.感受态细胞zuì好在冰上融化。
2.混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少zuì终用于涂板的菌量。
我公司销售的T1化学感受态细胞价格,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验一步实现单拷贝到高拷贝的转换--Copy Control克隆技术(附图)
表达的条件下可以提供启动oriV所需要的trf A基因产物。另外phage T1-resistant TransforMax EPI300-T1R E.Coli也可提供这个基因的产物。 二、CopyControl克隆和克隆诱导步骤(图2): 图1 图2 将目标DNA片断连接到已经线性化、去磷酸化的CopyControl pCC1 Vector上。 转化感受态细胞(TransforMax EPI300
一步实现单拷贝到高拷贝的转换---CopyControl克隆技术
TransforMax EPI300 E.coli菌株提供。 2.TransforMax EPI300 E.coli. 这是一个工程菌株,含有受诱导启动子严谨控制的trf A基因,在诱导表达的条件下可以提供启动oriV所需要的trf A基因产物。另外phage T1-resistant TransforMax EPI300-T1R E.Coli也可提供这个基因的产物。 图
法、 CaCl2、 RuCl等化学试剂法感受态细胞:处理后,细胞膜的通透性发生变化,成为能容许外源 DNA 分子通过时细胞的状态。转化细胞(转化子):带有异源 DNA 分子的受体细胞( Transformant )。本实验以 E.coli DH5α 菌株为受体细胞,用 CaCl2 处理受体菌使其处于为感受态,然后与 pUC18质粒共保温,实现转化。 pUC18质粒携带有抗氨苄青霉素的基因,因而使接受了该质粒的受体菌具有抗氨苄青霉的特性,用 Apr符号表示。将经过转化后的全部受体细胞经过适应稀释,在含氨
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