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广州市益满生物科技有限公司
1、将尼龙绢片置于待检粪样上,用塑料刮片在其上轻刮,使细粪渣透过尼龙绢孔上,取过滤后的粪便。
2、将定量板放在载玻片中部,然后把刮片上的细粪渣填入定量板的圆孔内,使其填满全孔并抹平、小心移走定量板,使粪样留在玻片上。
3、取1张浸泡好的亲水玻璃纸,抖掉多余的透明液,盖在粪样上,用一块较厚的载玻片轻压,使粪便均匀地展开于玻璃纸下。
4、将制备好的加藤片放于标本盒内(内垫吸水纸)。
5、编号后置室温25℃、湿度75%时约1小时或30~36℃温箱中约半小时后镜检。
寄生虫卵检测制片镜检及结果判断:
1、镜检:将透明好的加藤片置光学显微镜的载物台上,在低倍镜(10×)下镜检。镜检仔细检查每一个视野,并特别注意与未受精蛔虫卵的鉴定。计数全片虫卵(计数原则:数上不数下,数左不数右)。
2、加藤片的虫卵计数:以镜检每片检出的虫卵数的24倍数(一粪一检),即为每克粪便虫卵数(EPG)。
计算3张亲水玻璃纸、定量板、刮片加藤片的血吸虫卵数分别为A、B、C,每克粪便虫卵数(EPG)为:(A+B+C) ×8(一粪三检)。
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文献和实验。 3.软化制浆:将处理好的果实放在双层锅中,加入约为果实重80%或等量重的水,煮20~30分钟,待果实软化后,取出倒在筛孔径为0.5~1.0毫米的打浆机打浆,除去皮渣。如没有打浆机,可用木打浆板或木杆将果实捣烂,倒入细筛中,除去皮渣,再将果浆倒入双重锅中,加入果浆重10~30%的白砂糖及少量柠檬酸(根据果实含酸量高低而定,通常为果浆重量的0.3~0.5%,再用文火加热浓缩,注意搅拌,防止焦糊,浓缩至稠糊状,可溶性固形物含量达20%左右时出锅。 4.刮片烘干:将浓缩的果浆倒在钢化
水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用 pH 计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。 3. 加样 在 ELISA 中一般有 3 次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。加样时应将所加物加在 ELISA 板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。加标本一般用微量加样器,按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴,以免发生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加样。如测定需用稀释的血清(如间接
好电泳仪电源,恒压(100V左右)或恒流(30mA左右)电泳。当指示染料溴酚蓝到达凝胶前沿还有1~2cm时停止电泳,倒掉电极缓冲液,剥胶染色。 (7)剥胶后用蒸馏水洗涤胶片,然后浸入染色液中4~5h 或过夜。取出后用蒸馏水漂洗数次,浸入脱色液中振荡脱色,中途更换脱色液数次,至背景清晰透明为止。照相或进行凝胶干燥。 (8)凝胶干燥先在一块玻璃板上铺一张用水浸润透的玻璃纸,放上胶片,再盖上一张同样处理过的玻璃纸,用玻璃棒赶出可能窝藏的气泡。然后把玻璃纸多余的四边反向贴到玻璃板后面,在室温下自
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