荧光素Cy3标记大鼠IgM

SABC―Cy3法免疫荧光组织化学染色步骤

SABC ― Cy3 法免疫荧光组织化学染色步骤 在免疫荧光组织化学技术中，常用方法还有SABC-Cy3法。它的基本原理和染色步骤与免疫组织化学中SABC法大体相同，唯一不同的是亲和素―生物素―辣根过氧化物酶复合物中的酶组分被荧光素Cy3替代，从而形成亲和素―生物素-Cy3复合物，故称之为SABC―Cy3法。在其染色步骤中没有酶与底物和供氢体的显色作用，取而代之的是荧光素染色。由于Cy3所产生的荧光稳定性和敏感性好，而且SABC法放大系统效率高，所以，在样品抗原量少的情况下．此法

免疫组化中抗体选择要求

物。一般SP三步法二抗选择Biotin标记的二抗，以与后面的SP结合反应；而免疫荧光染色就需要购买不同荧光素标记的二抗，如罗丹明、FITC、Cy3等常用荧光素。这主要与后面有无三抗和三抗种类有关。（3）选择IgM还是IgG。一般一抗是IgM，那么二抗就选择IgM；反之，一抗是IgG，则二抗选择IgG。（4）生产厂家。一般SP三步法我们实验室选择中杉金桥的二抗染色试剂盒，内含有工作液的二抗，故试验中只需摸索一抗的浓度即可，效果还可以；而免疫荧光的二抗我一般选择Jackson ImmnoResearch公司

FITC荧光二抗？――EarthOx新型DyLight 488绿色荧光

。由于FITC是小分子化合物，每一个抗体可标记几个FITC分子，IgM通常用小分子的荧光素标记，如FITC、Cy3/5、Texas Red等。            我们知道，FITC的绿色荧光强度肉眼观察已经很亮了，但是从上面的图可见，与Cy2相比还是偏弱，而DyLight 488则更胜一筹。DyLight是一种新型的荧光分子，与传统的荧光团如FITC、Rhodamine、Texas Red等相比，具有更强的荧光强度、更高的光学稳定性以及特异性等。同时，DyLight种类