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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
132
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 检测范围:
详询
- 检测方法:
酶联免疫
- 应用:
科学研究
- 适应物种:
人、动物
- 标记物:
HRP(辣根过氧化物酶)
- 样本:
血清、血浆、组织液等液体样本
- 规格:
48T/96T
英文名称:Human selenoprotein 1,SEP1 ELISA KIT
说明书可直接向我司客服索取
样本需求量:
植物是组织样本,固体 要求的重量是大于50mg。血清血浆50微升以上,一个样本。对大鼠小鼠液体样本需求可以适当放宽,但必须大于10微升以上。
1,样本在保持鲜重的同时,重量不能低于50mg
2,组织匀浆比例按照10%进行,相当于1g组织加9ml的匀浆液,匀浆液要求用PBS,浓度是0.01mol/L,PH控制在7.2-7.4我们并不要求没个样本的重量必须保持1g整数,只要大于50mg即可,相对应匀浆液按照1:9的关系随之改变即可
3,剪碎叶片组织放入碾钵,然后液氮碾磨成粉末,加入换算后的匀浆液的量
4,离心取上清
[实验原理]
人硒蛋白1(SEP1)ELISA检测试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被指标捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
备注:换算结果是乘以加入匀浆液的量,除以称取的重量,这个最终换算比例相当于乘以9g除以1ml,如果检测细胞内部,需要加一个超声破碎过程!
组织匀浆三原则:
1,对于样本要求保持鲜重
2,称取样本中的重量不小于50mg,一般以1g为基准,但不严格要求固定样本每个重量必须达到相同的水平。
3,匀浆的比例选取10%,相当于1g组织加9ml的匀浆液来进行匀浆。
4,匀浆液选取PBS(PH=7.2-7.4,浓度为0.01mol/L)
5,匀浆过程选用组织匀浆器,冰浴上匀浆。(或者进行液氮碾磨)
6,离心取上清,离心转速选用5000转每分,时间是15分钟。取上清液待检!
“剪碎叶片组织放入碾钵,然后液氮碾磨成粉末,加入换算后的均浆液的量”这个不会处理的话,可以直接邮寄叶片我们处理。
人硒蛋白1(SEP1)ELISA检测试剂盒敬请前来订购!
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文献和实验为什么要做大规模提取? 1)节省成本:Umibio 大规模提取,同比试剂盒等方法提取节省人力成本,物力成本等 50% 以上,而且体积越大,成本优势越高; 2)提高效率:传统方法每个批次一般不会超过 300 ml,而大规模提取可以达数十升,一天内完成,以 10L 为例,时间可以压缩 90%,甚至更多; 3)方便质控:每个批次通过连续进样,最终出来的成品,通过一次的提取,不用担心每个批次提取的差异过大,数据更稳定,有说服力; 4)纯度飞跃:通过大规模提取工艺,可以大量的去除杂质,优化后纯度
测序仪进行双链DNA 测序的方法。热循环测序反应使用 Applied Biosystems Inc.的DyeDeoy TM Terminator Cycle Sequencing Kit(#401434)或FS-DNA Sequencing Kit(#402079)进行。操作过程主要根据厂家推荐的方法进行。具体操作方法如下。3.1 混合反应物(1)取2.5μl 纯化好的PCR 产物[相对于2.5μl 测序试剂盒中的pGEM-3Zf(+)DNA],进行琼脂糖凝胶电泳。(2)凝胶用溴化乙锭染色,用流水
去离子水中溶解,即为制好的DNA模板。 目前还有一些非常有效的商售试剂盒可用于纯化 PCR 产物,如 Oiagen PCR 产物纯化试剂盒等,但成本较高。 2 手动DNA 序列分析技术 2.1 测序胶的制备 按以下配方制备测序电泳胶: 6%胶工作液 70ml 10%过硫酸胺(APS) 70μl(新鲜配制) TEMED 70μl 将上述溶液混合后,灌入准备好的胶板中,将“鲨鱼齿”梳子反插入胶,深约0.5~1.0cm。室温下聚合1 小时左右2.2
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