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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
量大从优,欢迎询价
- 英文名:
/
- CAS号:
/
- 保质期:
12个月
- 供应商:
李记生物
- 保存条件:
常温
- 规格:
50ml/500mL
| 规格: | 50ml | 产品价格: | ¥68.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 500mL | 产品价格: | ¥358.0 |
考马斯亮蓝快染液
产品描述
李记生物研制生产的考马斯亮蓝快染液(蛋白快染液)和传统考马斯亮蓝染液一样,能快速结合蛋白质上的带正电的基团,从而在室温下对蛋白进行瞬时染色。
本产品只对蛋白进行染色,且速度快(2 min开始显色),无需脱色处理,尤其对于蛋白纯化实验,数分钟可以根据蛋白染色条带结果,决定下一步实验;操作简便、易保存,脱色后凝胶可在纯水中保存数周;绿色环保,无毒无刺激气味;适用性广,适用于实验室自己配制或者预制的 SDS-PAGE 胶及 Native 胶, 也可以用于 Western 转膜后 PAGE 胶上残余蛋白的染色。
订购信息
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产品名称 |
货号 |
规格 |
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考马斯亮蓝快染液 |
AP11L011 |
50mL |
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考马斯亮蓝快染液 |
AP11L014 |
500mL |
运输与保存
常温运输。常温保存,有效期12个月。
使用方法
1. 将电泳后的 PAGE 胶取下放入塑料容器中,加入适量染色液覆盖 PAGE 胶,取决于容器大小,通常约为 20-25 mL。
2. 置于摇床上摇动, 1-2 min 后条带开始显现。随时间推移染色条带会加深。通常染色时间可以从 30 min 到过夜均可。背景颜色基本不会随染色时间增强。【注】:因染液呈酸性,请勿徒手接触染液。
3. 染色结束后,将蛋白凝胶至于水中保存及取出拍照。因蛋白等电点不同,染料瞬时附着能力不同,建议染色 2h 以后或者过夜,再将凝胶放入水中效果更佳;置于水中保存,还有净化背景的效果。
注意事项
1. 本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
2. 染液可以重复利用 3 次。随使用次数的增加,染色速度略微下降,但不影响灵敏度。
3. 胶的厚度超过 1mm 请多加入染液并延长染色时间。
4. 和传统考马斯亮蓝染液一样,本染液结合蛋白质上的带正电的基团,不同蛋白之间定量比较需要考虑带正电氨基酸的数目,和蛋白所含的赖氨酸及精氨酸的数量及等电点有关,这导致了很多用户观察到的有的蛋白容易染色,有些染色较浅等问题。
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文献和实验一、原理:考马斯亮蓝G—250法于1976年由Bradform建立。考马斯亮蓝G—250具有红色和蓝色两种色调,在酸性溶液中,其以游离态存在呈棕红色,当它与蛋白质通过疏水作用结合后,变为蓝色。色素对可见光谱的最大吸收值从465nm转移到595nm处。蛋白质和色素的结合反应很快速,约在2分钟左右的时间内达到平衡,在室温1小时之内是稳定的。在0.01一1.0mg蛋白质/m1范围内,蛋白质含量与A 595值呈正比。二、染液配制: 100mg的考马斯克蓝G—250溶解于50m1 95%的乙醇中,加入
分子量这么小,用的SDS-PAGE胶浓度大一点,15%,跑胶时间不用太长,看见溴酚蓝跑的分离胶的中或中下部就停了,marker应该有专门小分子量预染marker,你找试剂公司的人跟他们讲一下你的要求,一般他们会有合适推荐给你的。转膜条件得摸,可以先按照实验室经常用的转膜条件试一下,如果是实验室转膜的目的蛋白分子量比如40kd用2h,你可以用1个小时试一下,转完以后的SDS-PAGE胶可以放到考马斯亮蓝染液染一下,看看小分子量蛋白转的情况,一抗先按照说明书建议的最高浓度做,二抗按照你所在实验
物,这种复合物会使蛋白质丧失了原有的电荷状态形成仅保持原有分子大小为特征的负离子团块。从而降低或消除了各种蛋白质分子之间天然的电荷差异,由于 SDS 与蛋白质的结合是按重量成比例的,因此在进行电泳时,蛋白质分子的迁移速度取决于分子大小。SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳的有效分离范围取决于胶的聚丙烯酰胺的浓度与交联度。☞ 各种需要用到的溶液配方考马斯亮蓝染液在 90 ml 甲醇:水(体积比 1:1)和 10 ml 冰乙酸混合液中溶解 0.25 g 考马斯亮蓝 R-250。用 0.45/0.22um 的膜抽滤











