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- 文献和实验
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- 库存:
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- 英文名:
NP40裂解液(带抑制剂)
- CAS号:
/
- 保质期:
12个月
- 供应商:
李记生物
- 保存条件:
裂解液4℃保存,其余-20℃保存。
- 规格:
100ml
产品描述
NP40裂解液(带抑制剂)是一种比较温和的细胞组织裂解液,主要成分为50 mM Tris(pH7.4),150 mM NaCl,1% NP-40以及sodium pyrophosphate,β-glycerophosphate,sodium orthovanadate,sodium fluoride,EDTA,leupeptin等多种抑制。对胞浆亚组分、胞核成分均有较强裂解作用,有利于胞浆蛋白、核蛋白、胞浆磷酸化蛋白及细胞核转录因子的提取。适用于常规的Western、IP和co-IP等实验蛋白样品的制备。
订购信息
| 产品名称 |
货号 |
规格 |
价格 |
| NP40裂解液(带抑制剂) |
AP01L054 |
100 mL |
228 |
产品组分
| 产品编号 | 产品组成 | 包装规格 |
| AP01L054 | NP40裂解液 | 100 mL |
| 磷酸酶抑制剂 | 2*1 mL | |
| PMSF | 1 mL | |
| 产品说明书 | 一份 |
保存方法
裂解液4℃保存,其余-20℃保存,保质期一年。
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- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验降解测序。 五、注意事项 细胞裂解采用温和的裂解条件,不能破坏细胞内存在的所有蛋白质-蛋白质相互作用,多采用非离子变性剂(NP40 或 Triton X-100)。每种细胞的裂解条件是不一样的,通过经验确定。不能用高浓度的变性剂(0.2% SDS),细胞裂解液中要加各种酶抑制剂,如商品化的 cocktailer。 使用明确的抗体,可以将几种抗体共同使用。 使用对照抗体: ① 单克隆抗体:正常小鼠的 IgG 或另一类单抗 ② 兔多克隆抗体:正常兔
高效液相色谱分离肽。将收集的肽在ABI 477A或494A机器上进行自动Edman降解测序。 四、注意的问题: (1)细胞裂解采用温和的裂解条件,不能破坏细胞内存在的所有蛋白质-蛋白质相互作用,多采用非离子变性剂(NP40 或Triton X-100)。每种细胞的裂解条件是不一样的,通过经验确定。不能用高浓度的变性剂(0.2%SDS),细胞裂解液中要加各种酶抑制剂,如商品化的 cocktailer。 (2)使用明确的抗体,可以将几种抗体共同使用 (3)使用对照抗体: 单克隆抗体:正常小鼠的IgG
,比如 RIPA,虽然裂解剧烈,但是无法维持蛋白天然构象,会破坏互作蛋白对。 如果自配,建议采用温和系统,比如 NP40/Triton 0.1%-1%;SDS ≤0.1%,盐离子≤150 mM 记得要加蛋白酶和/或磷酸酶抑制剂 结合液---利于蛋白之间的相互结合,要考虑孵育(结合)顺序 如果抗体和 beads 先孵育,建议 选择 pH 8.2(更常用)或者 pH 5.0 如果选用纯抗原作为诱饵蛋白 X 去拉裂解液中的靶蛋白 Y,抗体和抗原的结合 buffer 选择中性PBS/TBS 如果诱饵蛋白 X










