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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
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- 英文名:
SDS细胞裂解液(带抑制剂)
- CAS号:
/
- 保质期:
12个月
- 供应商:
李记生物
- 保存条件:
裂解液4℃保存,其余-20℃保存。
- 规格:
100ml
产品描述
SDS细胞裂解液(带抑制剂)是一种比较强烈的细胞组织裂解液,通过阴离子去垢剂SDS促进细胞膜的崩解,特别适用于膜蛋白或者细胞骨架蛋白等难溶蛋白的溶解,有利于膜蛋白,胞浆蛋白、核蛋白、胞浆磷酸化蛋白及细胞核转录因子的提取。本产品具有有强烈的蛋白变性作用,不能用于非变性蛋白方面的研究。本产品裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、染色质免疫共沉淀 (chromatin immunoprecipitation,ChIP)等。
订购信息
| 产品名称 |
货号 |
规格 |
价格 |
| SDS细胞裂解液(带抑制剂) |
AP01L065 |
100 mL |
228 |
产品组分
| 产品编号 | 产品组成 | 包装规格 |
| AP01L065 | SDS细胞裂解液 | 100 mL |
| 磷酸酶抑制剂 | 2*1 mL | |
| PMSF | 1 mL | |
| 产品说明书 | 一份 |
保存方法
裂解液4℃保存,其余-20℃保存,保质期一年。
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文献和实验降解测序。 五、注意事项 细胞裂解采用温和的裂解条件,不能破坏细胞内存在的所有蛋白质-蛋白质相互作用,多采用非离子变性剂(NP40 或 Triton X-100)。每种细胞的裂解条件是不一样的,通过经验确定。不能用高浓度的变性剂(0.2% SDS),细胞裂解液中要加各种酶抑制剂,如商品化的 cocktailer。 使用明确的抗体,可以将几种抗体共同使用。 使用对照抗体: ① 单克隆抗体:正常小鼠的 IgG 或另一类单抗 ② 兔多克隆抗体:正常兔
原理 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是利用抗原和抗体的特异性结合以及 Protein A 或 G 特异性地结合到抗体的Fc 片段的现象探测两个蛋白分子间是否存在相互作用的一种方法。在细胞裂解液中加入针对蛋白M的抗体,孵育后再加入Protein A 或 G 预处理的 Sepharose 珠,若细胞中有与蛋白M结合的蛋白 N,就可以形成这样一种复合物:“蛋白 N-蛋白M—抗蛋白 M 抗体—Protein A 或 G—Sepharose 珠”,经 SDS
裂解液将1 μg 相应的抗体和10~50 μl protein A/G-beads加入到细胞裂解液,4°C缓慢摇晃孵育过夜; 3. 免疫沉淀反应后,在4°C 以3 000 g 速度离心5 min,将protein A/G-beads离心至管底;将上清小心吸去,protein A/G-beads用1 ml 裂解缓冲液洗3~4次;最后加入15 μl 的2×SDS 加样缓冲液,沸水煮10分钟; 4. SDS-PAGE,Western blotting或进行质谱分析。 一、 样品











