- ￥228
- 李记生物
- AP01L076
- 上海
- 2025年12月20日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
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- 英文名：
Western/IP细胞裂解液（带抑制剂）
- CAS号：
/
- 保质期：
12个月
- 供应商：
李记生物
- 保存条件：
裂解液4℃保存，其余-20℃保存。
- 规格：
100mL
产品描述
Western及IP裂解液是一种在非变性条件下裂解细胞的裂解液，对胞浆亚组分、胞核成分均有较强裂解作用，有利于胞浆蛋白、核蛋白、胞浆磷酸化蛋白及细胞核转录因子的提取。适用于PAGE，Western，免疫沉淀(immunol precipitation，IP)和免疫共沉淀(co-IP)。
订购信息
| 产品名称 |
货号 |
规格 |
价格 |
| Western/IP细胞裂解液（带抑制剂） |
AP01L076 |
100ml |
228 |
产品组分
| 产品编号 | 产品组成 | 包装规格 |
| AP01L076 | Western/IP细胞裂解液 | 100 mL |
| 磷酸酶抑制剂 | 2*1 mL | |
| PMSF | 1 mL | |
| 产品说明书 | 一份 |
保存方法
裂解液4℃保存，其余-20℃保存，保质期一年。
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文献和实验或者互作蛋白复合物（红色+黄色）洗脱 Step 5：分析检测—Western Blot 或者质谱 常用“黑话” 以上示例图证明了 EDR1 和 EDR4 有相互作用。如果想要设计好实验，先清楚以下常用“黑话”含义。 阳性对照：证实细胞裂解物中确实存在靶蛋白（IP）或者互作蛋白对（co-IP，比如诱饵蛋白X和靶蛋白 Y），即为常说的 input。可直接取抽好的蛋白溶液进行 Western。 阴性对照：用来排除假阳性。IP/co-IP 后靶蛋白或者互作蛋白对都检测到了，固然是值得高兴
获细胞，加入适量细胞裂解缓冲液（含蛋白酶抑制剂），冰上裂解 30 min，细胞裂解液于 4 ℃，最大转速离心 30 min 后取上清； 取少量裂解液以备 Western blot 分析，剩余裂解液加 1 μg 相应的抗体加入到细胞裂解液，4 ℃ 缓慢摇晃孵育过夜； 取 10 μl protein A 琼脂糖珠，用适量裂解缓冲液洗 3 次，每次 3 000 rpm，离心 3 min； 将预处理过的 10 μl protein A 琼脂糖珠加入到和抗体孵育过夜的细胞裂解液中 4 ℃ 缓慢摇晃孵育
其他方法验证更详细的相互作用信息。 图 11：使用抗体进行 Co-IP 与使用 Strep-Tactin®XT 进行pull-down 融合蛋白沉降 pull-down IP 和 Co-IP 通过固定抗体来捕获诱饵蛋白质及其结合分子，而 pull-down 可使用带亲和标签的目的蛋白进行，在体外验证蛋白间的直接相互作用。Pull-down 是通过磁珠/琼脂糖填料固定带有标记的「诱饵」蛋白，从细胞裂解液、纯化蛋白或表达系统中捕获「猎物」蛋白，然后将复合物蛋白分离后进行凝胶或质谱分析，从而确认互作
