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- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
详询
- 细胞类型：
小细胞肺癌
- 肿瘤类型：
详询
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 库存：
100
- 英文名：
NCI-H446
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 年限：
详见说明书
- 运输方式：
常温运输/干冰运输
- 器官来源：
男；61岁
- 是否是肿瘤细胞：
是
- 细胞形态：
上皮细胞样
- 免疫类型：
详询
- 物种来源：
人
- 相关疾病：
小细胞肺癌
- 组织来源：
肺；转移灶：肋膜渗出癌；小细胞肺癌
别称：H446; H-446; NCI-446; NCIH446
种属：人
年龄（性别）：男；61岁
生长特性：半贴半悬
细胞形态：上皮细胞样
生长培养基：RPMI-1640(PM150110)＋10% FBS(164210-500)＋1% P/S(PB180120)
推荐传代比例：1:3-1:4
推荐换液频率：2-3次/周
冻存条件：冻存液：50%基础培养基+40%胎牛血清+10%DMSO
温度：液氮
培养条件 ：
气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃
背景描述：NCI-H446人小细胞肺癌(通过STR鉴定)是从一位小细胞肺癌患者的胸水中建立的，NCI-H446细胞的原始形态并不具有小细胞肺癌特征。NCI-H446细胞是小细胞肺癌的生化和形态学上的变种，表达神经元特有的烯醇酶和脑部肌酸激酶同功酶。NCI-H446细胞内左旋多巴脱羧酶、蚕素、抗利尿激素、催产素或胃泌激素释放肽未达到可检测水平。C-myc DNA序列扩增约20倍，c-myc RNA比正常细胞增加15倍。最初，传代培养基用RPMI-1640(含5%胎牛血清、10nM氢化可的松、0.005mg/ml胰岛素、0.01mg/
细胞计数
原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目即可换算出每mL细胞悬液中的细胞数量。
操作步骤：
1.将计数板及盖玻片擦拭干净，并将盖玻片盖在计数板上；
2.轻轻吹打细胞悬液，使细胞均匀分布；吸出少许细胞悬液滴在细胞入口，使细胞悬液充满盖玻片和计数板之间，静置1-2min，使细胞沉降；注意盖玻片下不要有气泡，也避免细胞悬液进入旁边的槽中；
3.在显微镜下对A/B/C/D四个大格内的细胞进行计数，压在大格四周边线上的细胞只计数压在2条边线上的细胞（如右侧和下方）；若镜下有2个细胞组成的细胞团，则应按单个细胞计算；若细胞团数量较多，占细胞总量的10%左右，则说明细胞分散不好会导致计算不准确，需要重新制备细胞悬液；
4.按公式计数细胞数量：细胞数/mL=四个大格内细胞总数×104/4
（每一个大格的体积为长1mm×宽1mm×高0.1mm=0.1mm3，1mL=1000mm3，因此计算时需×104）
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文献和实验据统计约 30% 细胞系被交叉污染或错误辨识，因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果……，这浪费大量时间、精力和金钱。Everything was going along fine until they discovered their HeLa cell line expressed Y chromosome markers因此近年 NIH、ATCC、Nature 和 Science 等对此多次发出呼吁，要求研究者对细胞进行鉴定。STR 基因
、 miRNA靶基因的验证与miRNA靶基因 的预测方法相比，对miRNA靶基因进行实验验证的方法并不多，目前还没有一个快速、简便、高通量的鉴定方法。最直接的鉴定方法是， 利用荧光定量PCR及Westernblot方法分别检测转染或敲低miRNA后细胞中mRNA水平及蛋白水平的变化，从而确定miRNA与靶基因的对应关系。这种方法能够直接鉴定出miRNA的靶基因， 准确度高但不能鉴定miRNA的靶位点。转染或敲低miRNA：方式主要有两种，一种是构建miRNA过表达载体的稳定表达系统，一种是人工合成miRNA
关于如何鉴定收到的新细胞是否有污染，很多站友，特别是新接触细胞培养的站友通常没有太多经验，在此我分享下我这边接收到新细胞后是如何判断是否有污染的。一、肉眼观察以下几项：1. 细胞瓶身：如果瓶身上没有裂缝，正常；如果瓶身上有裂缝，则污染几率非常大。2. 培养基颜色：如果培养基颜色是红色或者粉色，正常；如果是橙色，则可能是污染或者细胞过密；如果是黄色，则污染几率非常大。3. 培养基澄清度：如果培养基澄清，正常；如果有少许漂浮物，则可能是污染或者有细胞凋亡；如果培养基很浑浊，甚至出现絮状物，则污染
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