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- 2025年07月14日
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- 文献和实验
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‘-20℃保存
- 保质期：
有效期一年
- 库存：
30
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 规格：
50次
| 编号 | 成分 | 十孔盒包装（去纸托） |
| 试剂一 | 2×PCR MagicMix | 1mL（亮黄盖） |
| 试剂二 | 成分 PCR 引物混合液 | 100 uL（白盖） |
| 试剂三 | 成分 PCR 阳性对照 | 50 uL（黄盖） |
| 试剂四 | 超纯水 | 1 mL（本色盖） |
| 试剂五 | DNA 释放剂试用装 | 50 次（成分见下） |
| 试剂六 | 免 DNA 提取试剂溶液 A 成分一 | 50 uL（白盖） |
| 试剂七 | 免 DNA 提取试剂溶液 A 成分二 | 100uL（绿盖） |
| 试剂八 | 免 DNA 提取试剂溶液 B | 400 uL（红盖） |
| 试剂九 | 使用手册 | 1 份 |
简并性引物对PCR扩增有无影响?
有影响。简并数量应尽量少。
通常一条引物中简并的碱基不要超过4处，如果简并的碱基数过多，则会造成反应体系中有效引物的量相对减少，此时应适当增加引物的使用量。但引物量过大，容易引起非特异扩增，应加以注意。
适合的模板添加量是多少?
根据基因组DNA、质粒DNA及反转录产物等模板种类不同，PCR反应的适合模板添加量也不同。 特别是使用PrimeSTAR® HS DNA Polymerase时，过剩的模板量有时会对PCR扩增产生阻害作用。 另外，使用PrimeSTAR® Max DNA Polymerase时，根据模板种类、模板使用量及模板质量可调整PCR反应条件。
使用PrimeSTAR® Max DNA Polymerase时，模板可按以下推荐量添加（50 μl反应体系）：
· Human genomic DNA：5～200 ng
· E.coli genomic DNA: 100 pg～100 ng
· cDNA Library：1～200 ng
· λDNA：10 pg～10 ng
· 质粒DNA：10 pg～1 ng
PCR产物 (3‘端附有A碱基时) 经末端平滑后，克隆于去磷酸的平滑末端载体时，其PCR产物需不需要5′末端磷酸化?
需要。一般的PCR用引物5′末端都不带磷 (除非在引物合成时已特别标记)。使用这种引物进行PCR的PCR产物经末端平滑化后，与去磷酸的平滑末端载体连接之前，PCR产物必须进行5′末端磷酸化。
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文献和实验组织WHO、各国学者和相关政府部门的关注，短短几年，该技术已成功地应用于SARS、禽流感、HIV等疾病的检测中，在这次甲型H1N1流感事件中，日本荣研化学公司接受WHO的邀请进行H1N1 LAMP试剂盒的研制。通过荣研公司近十年的推广，LAMP技术已广泛应用于日本国内各种病毒、细菌、寄生虫等引起的疾病检测、食品化妆品安全检查及进出口快速诊断中，并得到了欧美国家的认同。LAMP方法的优势除了高特异性、高灵敏度外，操作十分简单，对仪器设备要求低，一台水浴锅或恒温箱就能实现反应，结果的检测也很简单，不需要像PCR
扩增。该方法最初需要耗费很多劳力，目前 NAAT 技术已经发展到实时 PCR（rtPCR）、环介导扩增（LAMP）、核酸序列依赖性扩增和链替代扩增，后 3 种方法避免了热循环。 四、病毒感染的诊断试验 1. 病毒诊断方法的演变 在 NAAT 技术出现前，病毒性呼吸道感染的诊断主要依赖于血清学，包括采用补体结合试验检测抗体水平的显著升高、采用免疫荧光或比色法检测病毒抗原和细胞培养分离病毒，这些检测常常没有结果，需要通过免疫荧光或血球吸附进行二次检测。在出结果的时间并不
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