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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
‘-20℃保存
- 保质期:
有效期一年
- 库存:
30
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 规格:
50次
| 编号 | 成分 | 十孔盒包装(去纸托) |
| 试剂一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黄盖) |
| 试剂二 | 成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白盖) |
| 试剂三 | 成分 PCR 阳性对照 | 50 uL(黄盖) |
| 试剂四 | 超纯水 | 1 mL(本色盖) |
| 试剂五 | DNA 释放剂试用装 | 50 次(成分见下) |
| 试剂六 | 免 DNA 提取试剂溶液 A 成分一 | 50 uL(白盖) |
| 试剂七 | 免 DNA 提取试剂溶液 A 成分二 | 100uL(绿盖) |
| 试剂八 | 免 DNA 提取试剂溶液 B | 400 uL(红盖) |
| 试剂九 | 使用手册 | 1 份 |
简并性引物对PCR扩增有无影响?
有影响。简并数量应尽量少。
通常一条引物中简并的碱基不要超过4处,如果简并的碱基数过多,则会造成反应体系中有效引物的量相对减少,此时应适当增加引物的使用量。但引物量过大,容易引起非特异扩增,应加以注意。
适合的模板添加量是多少?
根据基因组DNA、质粒DNA及反转录产物等模板种类不同,PCR反应的适合模板添加量也不同。 特别是使用PrimeSTAR® HS DNA Polymerase时,过剩的模板量有时会对PCR扩增产生阻害作用。 另外,使用PrimeSTAR® Max DNA Polymerase时,根据模板种类、模板使用量及模板质量可调整PCR反应条件。
使用PrimeSTAR® Max DNA Polymerase时,模板可按以下推荐量添加(50 μl反应体系):
· Human genomic DNA:5~200 ng
· E.coli genomic DNA: 100 pg~100 ng
· cDNA Library:1~200 ng
· λDNA:10 pg~10 ng
· 质粒DNA:10 pg~1 ng
PCR产物 (3‘端附有A碱基时) 经末端平滑后,克隆于去磷酸的平滑末端载体时,其PCR产物需不需要5′末端磷酸化?
需要。一般的PCR用引物5′末端都不带磷 (除非在引物合成时已特别标记)。使用这种引物进行PCR的PCR产物经末端平滑化后,与去磷酸的平滑末端载体连接之前,PCR产物必须进行5′末端磷酸化。
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文献和实验【公告】丁香通试用中心:10月免费试用装精选(10月18日有更新)
。 2. 鼠尾直接PCR试剂盒(常温裂解):一步法 PCR;处理鼠尾样本无需加热;用于高通量鉴定、筛选。 3. 通用植物直接PCR试剂盒:无需进行 DNA 纯化;高效特异性扩增样品;用于多种植物叶片的处理。 4.EDTA抗凝血直接PCR试剂盒:无需预处理血液;世界上血液耐受能力最强的 PCR 反应体系;安全可靠。 5.植物总RNA提取试剂盒:整套试剂盒RNase-Free;RNA得率高;质量高;安全快速。 有奖免费试用: RIPA裂解液(中) 火晶梯度PCR仪 康宁SORENSON
-A尾巴的RNA分子加上一串A尾巴,然后用带有一段通用序列(universal tag)的Oligo-dT及RT酶来合成cDNA。这样设计的一个好处就是一次RT反应合成了所有miRNA分子以及其他小RNA、mRNA对应的cDNA,接下来想用来检测什么都可以,细细算来省了不少特异引物和多次RT反应的钱呢!整个RT反应操作也是非常简单,加入预先混好的酶,37℃孵育60min,95℃孵育5min即完成cDNA合成。 最后一步就是取出一点cDNA为扩增模板,加入正反引物和real-time PCR 试剂盒
状态下,SYBR Green I发出微弱的荧光,但一旦与双链DNA结合,其荧光增加1000倍。所以,一个反应发出的全部荧光信号与出线的双链DNA量呈比列,且会随扩增产物的增加而增加。 SYBR Green I荧光染料与DNA双链的结合双链DNA结合染料的优点:实验设计简单,仅需要2个引物,不需要设计探针,无需设计多个探针即可以快速检验多个基因,且能够进行熔点曲线分析,检验扩增反应的特异性,低的初始成本,通用性好,因此国内外在科研中使用比较普遍。荧光探针法(Taqman 技术):PCR
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