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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Mycobacterium leprae
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50次
Mycobacterium leprae
麻风分枝杆菌(Mycobacterium leprae),俗称麻风杆菌,引起麻风,是 一种慢性传染病。流行广泛。麻风分枝杆菌的形态、染色与结核分枝杆菌相 似。麻风杆菌在病人体内分布(以瘤型一端病人为例)比较广泛。本产品是根据 PCR 原理开发的麻风分枝杆菌检测试剂盒,它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增麻风分枝杆菌,与其他病原没有交 叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
规格及成分:
| 成 份 | 编号 | 十孔盒包装 |
| PCR MagicMix 3.0 | 90805 | 1 mL(红盖) |
| 超纯水 | 100935 | 1 mL(亮黄色) |
| 麻风分枝杆菌PCR 引物混合液 | 13-67810yw | 100 μL(白盖) |
| 麻风分枝杆菌PCR 阳性对照(1×10E8 拷贝/μL) | 60908-67810pc | 50 μL(黄盖) |
| 使用手册 | 13-67810sc | 1份 |
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂:
样本DNA。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取 试剂盒兼容。可以选用本公司柱式细菌 DNAout,其使用手册可以从本公 司网站搜索产品名称或产品编号 60802-50 下载。 2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求 的样品起始量)中加 10μL 麻风分枝杆菌 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释 液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放 冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:
成分 |
样品管 N+2 个 |
PCR 阴性对照 |
PCR 阳性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 麻风分枝杆菌PCR 引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | - | - |
| PCR 阴性对照(水) | - | 18 μL | - |
| PCR 阳性对照(麻风分枝杆菌PCR 阳性对照的 10000 倍稀释液) | - |
- |
18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应 (35 个循环) |
95℃ | 30sec |
| 55℃ | 30sec | |
| 72℃ | 25sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 7 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有预期条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。 对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑 制剂的感染。
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文献和实验麻风杆菌形态上麻风杆菌与结核杆菌酷似,难以区别,亦表现明显的抗酸染色特性,常在病人溃破皮肤渗出液的细胞中发现,呈束状排列。麻风杆菌是至今唯一仍不能人工培养的细菌。以麻风杆菌感染小鼠足垫或接种至犰狳可引起动物的进行性麻风感染,为研究麻风的一种动物模型。 麻风杆菌口侵害人,可通过皮肤接触,或由飞沫传播,细菌由病人鼻分泌物及其他分泌物、精液或阴道分泌液中排出而感染他人。疾病潜伏期长,发病慢,病程长,迁延不愈。根据临床表现、免疫病理变化、细菌检查结果等可将麻风
- - - - 无致病性 三、麻风分枝杆菌 麻风是一种慢性传染病,侵犯皮肤、粘膜和外周神经组织,晚期还可侵入深部组织和脏器,形成肉芽肿病变。在世界各地均有流行,我国不少地区亦可见,但经大力开展防治工作后,病例已逐渐
- - - - 无致病性 三、麻风分枝杆菌 麻风是一种慢性传染病,侵犯皮肤、粘膜和外周神经组织,晚期还可侵入深部组织和脏器,形成肉芽肿病变。在世界各地均有流行,我国不少地区亦可见,但经大力开展防治工作后,病例已逐渐
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