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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详询
- 细胞类型:
人胚肾细胞
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 库存:
100
- 英文名:
293
- 生长状态:
贴壁细胞
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 器官来源:
胚胎
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 免疫类型:
详询
- 物种来源:
人
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
肾;以腺病毒5DNA进行转化
- 规格:
1×10⁶cells/T25培养瓶
别称:Hek293; HEK-293; HEK 293; HEK:293; 293; 293 HEK; Human Embryonic Kidney 293
种属:小鼠
年龄(性别):胚胎
生长特性:贴壁细胞
细胞形态:上皮细胞样
生长培养基:MEM(PM150467)+10% FBS(164210-500)+1% P/S(PB180120)
推荐传代比例:1:3-1:4
推荐换液频率:2-3天/次
冻存条件:冻存液:50%基础培养基+40%胎牛血清+10%DMSO
温度:液氮
培养条件 :
气相:空气,95%;CO2,5%温度:37℃
背景描述:293人胚肾细胞通过STR鉴定是剪切过的人腺病毒5(Ad5)转染的人胚肾细胞形成的永生化细胞,293 [HEK-293]细胞包含并表达转染的Ad5基因。早期报道中指出,293 [HEK-293]细胞基因组中含有腺病毒5(Ad5)基因组的左侧端和右侧端的DNA,但是现在明确了只存在其左侧端的DNA。经过对Ad5的插入点的克隆测序发现,Ad5的1-4344位线性核苷酸整合入293 [HEK-293]细胞19号染色体(19q13.2)。293 [HEK-293]细胞为人类腺病毒载体扩增的宿主,可表达异常的玻连蛋白的细胞表面受体,由整合素β1亚单位和玻连蛋白受体α-v亚单位组成。
细胞计数
原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目即可换算出每mL细胞悬液中的细胞数量。
操作步骤:
1.将计数板及盖玻片擦拭干净,并将盖玻片盖在计数板上;
2.轻轻吹打细胞悬液,使细胞均匀分布;吸出少许细胞悬液滴在细胞入口,使细胞悬液充满盖玻片和计数板之间,静置1-2min,使细胞沉降;注意盖玻片下不要有气泡,也避免细胞悬液进入旁边的槽中;
3.在显微镜下对A/B/C/D四个大格内的细胞进行计数,压在大格四周边线上的细胞只计数压在2条边线上的细胞(如右侧和下方);若镜下有2个细胞组成的细胞团,则应按单个细胞计算;若细胞团数量较多,占细胞总量的10%左右,则说明细胞分散不好会导致计算不准确,需要重新制备细胞悬液;
4.按公式计数细胞数量:细胞数/mL=四个大格内细胞总数×104/4
(每一个大格的体积为长1mm×宽1mm×高0.1mm=0.1mm3,1mL=1000mm3,因此计算时需×104)
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文献和实验据统计约 30% 细胞系被交叉污染或错误辨识,因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果……,这浪费大量时间、精力和金钱。Everything was going along fine until they discovered their HeLa cell line expressed Y chromosome markers因此近年 NIH、ATCC、Nature 和 Science 等对此多次发出呼吁,要求研究者对细胞进行鉴定。STR 基因
腺病毒可以在293A细胞中进行转录,表达并可进行包装复制出大量高滴度病毒。293T是一种逆转录包装表达细胞,我做过也可进行表达,但还没有具体鉴定表达后的病毒是否可用。293细胞系是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒(Ad 5)DNA的永生化细胞,表达转染的腺病毒5的基因。细胞来源都是人肧肾上皮细胞,293T细胞表达E1A蛋白,SV40大T抗原,含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。293FT细胞能制造高滴度的慢病毒。293A细胞来源于人肾纤维母细胞,组成性表达E1A 和E1B 蛋白
9 可能促进脱靶效应,这阻碍了其应用于需要高精确度的基因组编辑。而 IDLV 适合递送 Cas9 组分至静息细胞,更适合临床研究,目前已有相关研究成果发表。 作者设计了针对 GFP 的靶点,分别以 LV、IDLV 感染 HEK293T 细胞,在第 7 天提取细胞做全外显子组测序(WES)分析,鉴定出了 16 个基因存在脱靶 4: 载体构建示意图 WES 鉴定脱靶的基因 LV 诱导的插入缺失的频率在 3.4%-24%(深线),而 IDLV 显示出较弱的诱导脱靶插入缺失的能力 0%-6.5%(浅线
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