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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详询
- 细胞类型:
非洲绿肾
- 肿瘤类型:
详询
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 库存:
100
- 英文名:
COS-1
- 生长状态:
贴壁细胞
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 器官来源:
成年
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
成纤维细胞样
- 免疫类型:
详询
- 物种来源:
猴
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
肾;SV40转染
- 规格:
1×10⁶cells/T25培养瓶
别称:Cos-1; COS1; Cos1; CV-1 in Origin Simian-1
种属:猴
年龄(性别):成年
生长特性:贴壁细胞
细胞形态:成纤维细胞样
生长培养基:DMEM高糖(PM150210)+10% FBS(164210-500)+1% P/S(PB180120)
推荐传代比例:1:3-1:4
推荐换液频率:2-3次/周
冻存条件:冻存液:50%基础培养基+40%胎牛血清+10%DMSO
温度:液氮
培养条件 :
气相:空气,95%;CO2,5%温度:37℃
背景描述:COS-1(非洲绿猴SV40转化的肾细胞)源自CV-1细胞,经带有编码野生型T抗原的起始失活突变的SV40转染得到。COS-1细胞含有一个来自SV40基因组全部早期区域的组成型拷贝。
细胞计数
原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目即可换算出每mL细胞悬液中的细胞数量。
操作步骤:
1.将计数板及盖玻片擦拭干净,并将盖玻片盖在计数板上;
2.轻轻吹打细胞悬液,使细胞均匀分布;吸出少许细胞悬液滴在细胞入口,使细胞悬液充满盖玻片和计数板之间,静置1-2min,使细胞沉降;注意盖玻片下不要有气泡,也避免细胞悬液进入旁边的槽中;
3.在显微镜下对A/B/C/D四个大格内的细胞进行计数,压在大格四周边线上的细胞只计数压在2条边线上的细胞(如右侧和下方);若镜下有2个细胞组成的细胞团,则应按单个细胞计算;若细胞团数量较多,占细胞总量的10%左右,则说明细胞分散不好会导致计算不准确,需要重新制备细胞悬液;
4.按公式计数细胞数量:细胞数/mL=四个大格内细胞总数×104/4
(每一个大格的体积为长1mm×宽1mm×高0.1mm=0.1mm3,1mL=1000mm3,因此计算时需×104)
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文献和实验传代步骤比较传统:倒掉培养液->PBS洗2遍->胰酶0.25%消化->倒掉胰酶->加培养基->用吸管吹打均匀->分瓶->放置37度,5%CO2孵箱。我的体会是:1、消化时间和实验环境温度也有很大关系,我们实验室条件比较差,不能维持恒温(不过我想大部分实验室目前也还是做不到的)。夏天的时候,消化特别快。但是到了冬天,就很慢,要用手捂老半天。2、消化到什么程度可以,经验很重要,如果每瓶消化都要通过显微镜观察来判断,首先效率太低,而且还很容易消化过头。对光观察培养瓶,当感觉到有些泛白,瓶角有少许细胞
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