5毫升二维码冻存管

如何让细胞乖乖的死去活来

无论再怎么小心，细胞在冷冻和复苏过程中总会死掉一批的。所以，一开始冻存细胞的数量要足够。一般最低要达到 5×106/毫升，一瓶不够两瓶凑。但是，这个不能一概而论。有些细胞，比如杂交瘤细胞，只需要 1-3x106/毫升。 4、做好标记 把培养瓶放入提手，末端应该扎有小牌，注明主人的名字，细胞名称和冻存日期。还要在每个冻存管上写上细胞名称，代数和冻存日期。 实验室的液氮罐都是公用的。每个人应该有属于自己的提手。小编当年就发生过为了找自己的细胞，被迫把整个液氮罐翻了个底朝天的惨剧

细胞的冻存与复苏

一、   程序冻存步骤（需梯度降温） 1、 配置冻存液，冻存液推荐配比：55%（基础培养基）+40%(血清)+5%（DMSO）或90%胎牛血清+10%DMSO；推荐使用Procell通用血清型程序冻存液，货号PB180436； 2、 制备好的细胞悬液计数，计算总细胞量； 3、 细胞离心后尽量吸干净上清，离心转速1200rpm（250g）3min； 4、 加入配置好的冻存液重悬，调整细胞浓度为3×106~1×107cells/mL； 5、 分装入冻存管，一个冻存管分装1~1.5毫升； 6、 

细胞培养常用设备及实验技巧（二）

）后换液继续培养培养，换液的时间由细胞情况而定。初学者易犯错误：1.水浴锅未预热或者未预热到37℃。2.水浴锅内冻存管太多，导致传热不佳，使融化时间延长。3.离心前忘记平衡，导致离心机损坏和细胞丢失。4.一次复苏细胞过多，忘记更换吸头和吸管，导致细胞交叉污染。细胞计数实验原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目，即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。具体操作：一、准备工作：取一瓶传代的细胞，按照《传代细胞培养（消化法）》中的传代方法繁殖细胞，待长成单层后以被使用。二