单抗制用SP2/0小鼠骨髓瘤细胞

用于融合的动物骨髓细胞系

率及所产生的杂交瘤细胞系的稳定性等方面均可与PS-X63-Ag8或P3-NS1/1-Ag4-1相比拟。 4．小鼠P3-X63-Ag8-U1（1980年Sharon）。是P3-X63-Ag8骨髓瘤细胞系的变系。P3-X63-Ag8分泌重链（rl）和轻链（K），P3-NS1/1-Ag4-1则只合成而不分泌轻链（K）。 5．小鼠SP2/O-Ag14（1978年Shulman）。Kohler等将PS-X63-Ag8骨髓瘤细胞系与具有抗绵羊红细胞活性、产生r2b重链和K轻链的BALB/c小鼠

制备单克隆抗体骨髓瘤细胞的选择

DNA，因而对HAT敏感。 目前常用的小鼠骨髓瘤细胞系为SP2 /O和NS-1 ，X63Ag8.653等。均来自BALB/c小鼠骨髓瘤。刚复苏的瘤细胞需在含10％新鲜小牛血清的RPMI-1640培养液中，5％CO2 37℃ 孵箱培养。每2～3天换液一次，3～5天传代一次，待细胞生长稳定后方可供细胞融合用。生长良好的细胞，在倒置显微镜下观察为圆形明亮，排列整齐、形态完整，密度适宜(0.1～1×106 个/ml)。经台盼蓝染色，活细胞数应>90％。实验室培养的骨髓瘤细胞最好每隔3～6个月将细胞

抗体的轻、重链嵌合基因共转染受体细胞

抗体的轻、重链嵌合基因共转染受体细胞   目前将重组子导入宿主细胞主要采用的方法有磷酸钙沉淀法、DEAE-葡聚糖街道法介导法、聚季铵盐介导法、原生质体融合法、电转染法以及微注射法。其中以电转染效率较高。 【材料和试剂】 （1）      小鼠骨髓瘤细胞系Sp2/0细胞或P3X63.Ag8.653细胞，或CHO细胞。 （2）      已构建的轻、重链嵌合基因质粒DNA。 （3）      脂质体。 （4）      电转