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文献和实验双向免疫扩散(Double immunodiffusion)—抗原分析实验
:0.5µg/ml牛血清白蛋白(BSA)、0.5µg/ml人血清白蛋白(HSA) 抗体:兔抗人血清白蛋白加兔抗牛血清白蛋 湿盒 三、实验方法 1.将已溶化的1%盐水琼脂管放58°C -60°C水浴箱中平衡温度备用。 2.将载玻片置于水平桌面上,倾注已溶化琼脂3.5-4ml,使成厚度约1.5mm琼脂板(注意:倾注速度不要过快,以免琼脂溢出载玻片;倾注过程要连续以保证琼脂板均匀、平滑)。 3.琼脂凝固后,将打孔模板置于琼脂板下,然后用打孔
材料 1%琼脂(生理盐水配制)管,每管约4ml 载玻片 打孔器及打孔模板 微量加样器及塑料吸头 抗原:0.5µg/ml牛血清白蛋白(BSA)、0.5µg/ml人血清白蛋白(HSA) 抗体:兔抗人血清白蛋白加兔抗牛血清白蛋白 湿盒三、实验方法 1.将已溶化的1%盐水琼脂管放58℃~60℃水浴箱中平衡温度备用。 2.将载玻片置于水平桌面上,倾注已溶化琼脂3.5~4ml,使成厚度约1.5mm琼脂板(注意:倾注速度不要过快,以免琼脂溢出载玻片;倾注过程要连续以保证琼脂板均匀、平滑
和第3支空试管中,然后往第2支试管中加0.1ml抗HRP,往第3支试管中加0.1mg/ml HRP 0.1ml; 5. 混匀,在室温放1h后观察。如第2支试管中产生沉淀,说明其对应的第1支反应管中抗原过量;如第2支试管中不产生沉淀,而第3支试管中产生沉淀,说明其对应的第1支反应管中抗体过量; 6. 制备PAP时,HRP的浓度应选取抗原过量管的前一管。 [附注2] 兔(或羊)抗HRP的制备 1. 兔抗HRP的制备:取HRP1mg溶于生理盐水中,加弗氏完全佐剂1ml充分乳化
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