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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型:
原代细胞
- 供应商:
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 库存:
26
- 生长状态:
良好
- 年限:
2年
- 运输方式:
常温避光
- 物种来源:
兔
- 规格:
>5×105细胞数
细胞详述:
髓核是乳白色半透明胶状体,富于弹性,为椎间盘结构的一部分,位于两软骨板与纤维环之间。由纵横交错的纤维网状结构即软骨细胞和蛋白多糖黏液样基质构成的弹性胶冻物质。髓核细胞的过早衰老与凋亡是导致椎间盘退行性变过程的主要原因之一,主要表现为退变椎间盘内髓核细胞功能降低和数量减少,使得其Ⅱ型胶蛋白聚糖等基质分泌量下降,终导致椎间盘维持脊柱高度、承受各方应力等生物力学功能丧失。
使用兔原代髓核细胞:
1)本产品仅能用于科研
2)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3)本产品未通过用于活体诊断的审核
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常椎间盘组织。
2)细胞鉴定:Ⅱ型胶原(Collagen Ⅱ)免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)兔原代髓核细胞生长方式:梭形或多角形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
产品兔原代髓核细胞的运输和保存:
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
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文献和实验实验材料: 1. 正常兔晶状体组织; 2. 不含Ca 2+ 和Mg 2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. 注射器; 4. 培养器具:培养瓶或皿( 用多聚赖氨酸包被)、眼科剪、镊子等; 培养方法: 1. 空气注射处死大兔,在无菌条件下清除巩膜外肌肉及结缔组织后将眼球浸入含双抗的1×PBS(pH7. 2 )浸泡5min ,移入超净工作台内; 2. 用含双抗的1×PBS(pH7. 2 )冲洗 组织
丁香园网友clellwei的观点为:原代椎间盘细胞培养其实并不太难,但培养时间相对较长,所以容易出问题。1、选材很关键选用胎儿椎间盘进行原代培养相对容易一些,可利用反复传代的方法来制作退变模型。直接选择人退变椎间盘进行培养时(一般选择手术摘除的椎间盘),患者的年龄及间盘的退变情况必须充分考虑在内。若年龄偏大,间盘退变很严重,培养的难度相应增大。20-50岁之间的患者都可采用。如果实验需要进行纤维环和髓核细胞的分别培养,在取回间盘时需仔细分离。2、操作需仔细原代培养的过程并不太复杂,从取回间盘
较简单;但容易产生杂质如成纤维细胞等,成纤维细胞生长快,故培养之细胞质量较差;培养的大多数细胞无收缩性;且原代细胞的获得需3~4周,获得大量平滑肌细胞耗时长(17)。既往酶消化法较组织块法复杂、精细;适宜的酶浓度和培养时间的确定较为困难;然而在较短时间内可获得大量的平滑肌细胞,1996年有学者报道(Chambers(18)等)酶消化法纯度为70%。可见一种快速、高效、高纯度的酶消化法培养膀胱平滑肌的方法显得尤为重要。 本实验研究两只兔所有标本均获成功。倒置显微镜观察平滑肌细胞24小时均可见膀胱平滑
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