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- 信帆生物
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- 2025年07月07日
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信帆生物
简单介绍:定量检测线粒体、血清、血浆、培养细胞等样品中的琥珀酸脱氢酶(SDH)活性
注意事项:利用琥珀酸脱氢酶与人造受体P-碘硝基四唑紫(INT)反应,分光光度计检测490nm处吸光度,计算没得活性。。
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文献和实验琥珀酸脱氢酶硝基蓝四唑盐法 在生物代谢过程中，由氢的供体(donor)把氢原子转移到氢的受体(receptor)的酶促反应称脱氢酶反应，该反应由脱氢酶(dehydrogenases)催化。脱氢酶种类很多，其活性均可通过四唑盐显示。四唑盐作为脱氢酶反应中的受氢体，接受脱氢酶作用于底物所释放的氢而形成有色的甲腊(formazane)，沉积于酶所在部位。 琥珀酸脱氢酶(succlnate dehydrogenase，SDH)是线粒体呼吸链的第一个酶，存在于所有有氧呼吸的细胞
对细胞进行计数。通常计数7 d。为精确起见，一般每次计数3瓶细胞并取平均值。典型的生长曲线可分为生长缓慢的潜伏期，斜率较大的指教生长期，呈平台状的平顶期及退化衰亡4个部分。以存活细胞数(万／mL)对培养时间(h或d)作图，即得生长曲线。 除使用计数法测定细胞的生长曲线外，还可用MTr比色法间接测量之。MTT比色法的主要原理是：MTr被活细胞中线粒体琥珀酸脱氢酶还原后，生成暗蓝色甲瓒，甲瓒被助溶剂溶解后，可在酶标仪上读取光吸收值(OD)，在一定范围内光吸收值(OD)与活细胞数量呈线性
MTT 比色法检测TNF的生物活性 【操作步骤】 （1）取对数生长期的L929细胞，用0.25%胰蛋白酶消化2-3min，然后洗涤细胞2次，以去除消化液及原生长培养液； （2）用RPMI-1640培养液调L929细胞浓度为2×105/ml； （3）将上述细胞悬液加至96孔培养板，100 ul/孔； （4）置37℃，5% CO2培养箱中培养24h； （5）吸去细胞培养上清液后，各孔分别加入倍比稀释的标准品和待测样品，100ul
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