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- 信帆生物
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- xf20195593
- 2025年07月16日
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信帆生物
简单介绍:药典缓冲液部分
注意事项:2-氧代戊二酸（α-酮戊二酸）、三乙醇氨、盐酸等
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文献和实验亦称谷氨酰胺 -2-氧代（α酮）戊二酸氨基转移酶。缩写为 GOGAT。此酶可催化谷氨酰胺的胺基在 NAD（ P） H或还原型铁氧还蛋白的存在下，还原转移于α -酮戊二酸，生成 2分子谷氨酸： L-谷氨酰氨 α -酮戊二酸 [2H]→ 2L-谷氨酸也可以说是以谷氨酰胺的胺基为氨供体还原α -酮戊二酸为谷氨酸的酶。是含 Fe及 S的黄素酶， EC1， 4， 1， 13（ NADPH）， 1， 4， 1， 14（ NADH）， 1， 4， 7， 1（含铁氧还素
】1. 消化缓冲液：100 mM NaCl，10 mM Tris.Cl (pH8.0) 25 mM EDTA (pH8.0)，0.5% (w/v) SDS，0.1 mg/mL 蛋白酶 K。2. 7.5mol/L 乙酸铵。3. 100% 乙醇。4. 酚/氯仿/异戊醇。【实验方法与步骤】1. 将新鲜组织剪成小块并立即置于液氮中冻存；2. 将 200 mg～1 g 的组织用预冷的研钵研碎，或用锤子将其捣为细粉末，每 100 mg 组织用 1.2 mL 消化缓冲液悬浮，然后于 50℃ 摇荡温育 12~18 h
好的输液瓶中，贴上标签，4℃保存备用。 6．蛋白酶K（降解蛋白质）：20mg/mL 无菌三蒸水溶解。 7．RNA酶 （降解RNA） 配制方法：将胰RNA酶（RNA酶A）溶于10mmol/L的Tris?CL（PH7.5）、15mmol/LNaCL中，配成10mg/ml的浓度，于100℃加热15min，缓慢冷却至室温，分装成小份存于?20℃。 8．氯仿：异戊醇=24：1 100ml 按24:1的比例加入氯仿、异戊醇，摇匀，转到准备好的瓶中，贴上标签，4℃保存备用。 9．TE缓冲液（溶解DNA） PH8
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