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100
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信帆生物
简单介绍:药典缓冲液部分
注意事项:芭比妥钠、氯化钠、明胶和盐酸
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文献和实验0.05mol/L Tris-HCl缓冲液(pH7.19~9.10)
pH 0.2mol/L Tris(ml) 0.2mol/L HCl(ml) H2 O
底物范围较广,包括二氨基联苯胺 (DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。 二氨基联苯胺/金属盐 DAB 是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物,在水和醇中不溶解。多数情况下,推荐在 DAB 中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中,辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产物呈暗蓝灰色至黑色,且在水及醇中稳定。DAB/金属盐染色应用的组织染色范围较广。 1. 需要的溶液和特殊设备 DAB,0.05 mol/L Tris 缓冲液 (pH7.6), 0.3% (W
mol/L, pH7.0磷酸盐缓冲液进行透析,然后改用含0.1mol/L氯化钠的上述缓冲液透析,用奈氏试剂检查.透析外液中无铵离子为止。透析完毕后,将酶液上DEAE-纤维素-32柱(2.6×50cm),该柱要预先用含0.1mol/L氯化钠的0.01mol/L, pH7.0磷酸盐缓冲液平衡。当样品吸附完毕后,开始线性洗脱。洗脱液为含氯化钠的0.01mol/L, pH7.0磷酸盐缓冲液,梯度混合器的贮液瓶放280mL含0.42mol/L氯化钠的缓冲液,混合瓶放280mL含0.1mol/L氯化钠的磷酸盐缓冲液
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