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4℃,12个月
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100
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信帆生物
简单介绍:血液保存液,1.5mlCPD抗凝剂+10ml血,2-6℃保存35天。
注意事项:主要由柠檬酸钠、柠檬酸、葡萄糖、磷酸盐、腺嘌呤等组成。配置后可于4℃冰箱保存3个月,如果使用量少,可先适当分装保存,避免污染。
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文献和实验1、将静脉血20ml用ACD抗凝剂以容积比血:抗凝剂=9:1抗凝处理 2、按血:分离液=1:2注入国产淋巴细胞分离液上层,400g 20℃离心30分钟 3、交接层重浮于4倍体积的RPMI1640并通过离心法200g,10min洗三次 4、获得细胞可做分选或其他实验。 体会: 1、实验中我用过肝素方法抗凝,但效果不好,因为肝素抗凝后交接层混浊,洗涤后没有细胞。后来是一位老师推荐我用ACD抗凝剂,效果very good 2、实验用的是国产淋巴细胞液(天津TBD),没有用过进口
剂以观察有无凝因。同时记录抽出液量,不宜选用草酸盐和EDTA粉剂作抗凝,因为这些物质影响滑膜液的结晶检查,如果注射器中抽出液很少仅几滴时,采取标本后应酬注意即时送验及时检查。 如果浮雕膜液须保存,必须离心除去细胞,因为细胞内酶释放出来会改变滑膜液的成分。4摄氏度下可保存10天,必要时置负20摄氏度下冻结,如不能及时测补体或酶等应保存在负70摄影氏度以下。
附录四 常用抗凝剂的配制及用法 在医学实验中常需动物的全身抗凝,采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。对抗凝剂的要求是:用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。 一、肝素 (1)肝素抗凝作用原理 肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂,肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力,阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用,从而使血液不发生凝固。 (2)配制和用量 纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U
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