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- 文献和实验
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- 保存条件:
室温,6个月
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100
- 供应商:
信帆生物
简单介绍:抗p体与荧光团或生物素结合
注意事项:主要由羟胺、去离子水组成,调PH8.0。
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文献和实验1. 临用之前制备羟胺溶液,置冰上待用。 2. 将用氯化铯纯化的 10 μ g 质粒 DNA 加到含 500 μ l 羟胺溶液的微型离心管。 3. 在 37 ℃下培养 20 小时。 4. 加入 10 μ l 的 5mol/L NaCl 、 50 μ g 1mg/ml 的牛血清蛋白( BSA )和 1ml 无水乙醇终止反应,置- 70 ℃沉淀 DNA10 分钟。 5. 离心 10 分钟,小心弃去所有上清液,收集 DNA 。
质粒 DNA 的羟基突变 1. 临用之前制备羟胺溶液,置冰上待用。 2. 将用氯化铯纯化的 10 μ g 质粒 DNA 加到含 500 μ l 羟胺溶液的微型离心管。 3. 在 37 ℃下培养 20 小时。 4. 加入 10 μ l 的 5mol/L NaCl 、 50 μ g 1mg/ml 的牛血清蛋白( BSA )和 1ml 无水乙醇终止反应,置- 70 ℃沉淀 DNA10 分钟。
Na2EDTA•2H2O,用NaOH调pH至8.0(约需2 g 左右的固体NaOH),溶解后定容至100 ml。(6)GUS酶提取液:0.1 M 磷酸缓冲液(pH7.0)取50 ml;10% SDS取1 ml; 0.5 M EDTA(pH8.0)取2 ml;Triton X-100取100 ul;β-巯基乙醇100 ul;用水定容至100 ml。(7)MUG底物:称8.8 mg MUG,溶于10 ml GUS酶提取液中,配制成2 mmol/L 的工作浓度。(8)反应终止液(0.2 mol/L Na
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