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- 信帆生物
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- xf20193018
- 2025年07月05日
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信帆生物
简单介绍:细胞培养抗生素
注意事项:无菌溶液。主要由青霉素、链霉素、庆大霉素等组成,经过滤除菌。
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文献和实验；3. 用等体积酚/氯仿/异戊醇抽提样品，1700×g，离心 10 min。如果样品溶解得不好，再加 1 体积不含蛋白酶 K 的消化缓冲液，重复离心。如果在界面上有一层厚的白色物质，重复抽提一次，将上层 (水溶液) 转移至一个新离心管中；4. 加入 1/2 体积 7.5mol/L 乙酸铵和 2 倍体积 100% 乙醇，12 000 rpm 离心 2 min；5. 用 70% 乙醇洗涤，晾干，沉淀用 TE 缓冲液或无菌双蒸水重新溶解, 使终浓度在约 1 mg/mL。注: 加入 0.1% 的 SDS 和 1? 滋
以10%浓度注入培养液中。 （3） 青霉素、链霉素双抗溶液 青霉素100万单位及硫酸链霉素1g无菌条件下溶于消毒三蒸水10ml，分装，-20℃保存。使用时每1000ml培养液加入青、链霉素混合液1ml，最终浓度为青霉素100单位/ml，链霉素100μg/ml。 （4）磷酸盐溶液（PBS）： NaCl 8g, KCl 0.4g, NaHPO4.H2O 1.15g KH2PO4 0.2g 分别溶于1000ml三蒸水中，调节PH值至7.4高压蒸气灭菌，分装后4℃保存
实验材料： 1. 骨髓来源：骨髓材料由健康人提供； 2. 清洗液：不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100µg/ml链霉素，pH7.2； 3. 分离液：密度为1.073g/ml的Percoll溶液； 4. DMEM-LG培养液：含1000mg/L葡萄糖的DMEM培养液，补充10%胎牛血清、青霉素100IU/ml、链霉素100µg/ml； 5. 消化液：为0.25%胰蛋白酶-0.1%EDTA混合消化液； 实验
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