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- 技术资料
- 细胞类型:
原代细胞
- 供应商:
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 库存:
37
- 生长状态:
良好
- 年限:
2年
- 运输方式:
常温避光
- 物种来源:
人
- 规格:
>5×105细胞数
产品使用:
1)本产品仅能用于科研
2)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3)本产品未通过用于活体诊断的审核
我们推荐使用人原代脂肪间充质干细胞培养基。
细胞特性:
1)细胞来源于手术取得的正常人脂肪组织。
2)细胞鉴定:CD44免疫荧光染色为阳性,CD45免疫荧光染色为阴性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:成纤维样细胞,贴壁培养。
人原代脂肪间充质干细胞的运输和保存:
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
人原代脂肪间充质干细胞详述:
脂肪间充质干细胞是从脂肪组织中分离得到的一种具有多向分化潜能的干细胞。主要恢复组织细胞的修复功能,促进细胞的再生,恢复年轻面容的同时,身体机能也得到充分改善,有效改善亚健康、早衰等疾病,由内而外真正的有效抵抗衰老。
脂肪间充质干细胞能够在体外稳定增殖且衰亡率低,同时它具有取材容易、少量组织即可获取大量干细胞,适宜大规模培养,对机体损伤小等优点,而且其来源广泛,体内储备量大,适宜自体移植,逐渐成为近年来新的研究热点之一。
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文献和实验实验大纲 骨髓间充质干细胞是多能干细胞。因此,作为再生医学的细胞来源,它是活性研究和临床应用的目标。当骨髓液或骨髓细胞接种在培养皿上时,间充质干细胞会作为粘附细胞增殖。因此,间充质干细胞可以从漂浮的血细胞中分离出来。在此,我们报告了使用 Evident Prov CM20 培养监测系统对间充质干细胞原代培养的远程监测结果。 试验程序 使用补充了 10% 胎牛血清(FBS)和 1% 青霉素链霉素的 Iscove 改良 Dulbecco 培养基(IMDM),将市售人骨髓细胞以 950,000
吸管反复吹打使组织块分散,然后通过孔径25μM(200目)的筛网过滤,收集滤液和未过滤的组织块。5、将滤液以600g离心5分钟弃上清,加入原代培养的基础培养基制成细胞悬液。6、将未滤过的组织按照上述过程再处理一次,将俩次获得的细胞悬液混匀计数,按照104个/cm2的密度接种于培养瓶里,于37度,5%CO2培养箱中培养。接种12-16小时基本贴壁。在增殖状态下的前脂肪细胞可以使用胰蛋白酶消化的方法传代,并且可以冻存和复苏。
1. 乙醚麻醉致死大鼠(3~5 weeks)/小鼠(1~2月,年龄稍大可保证细胞数量)注:1、建议用大鼠做,小鼠取样时,细胞数量偏少,较难养活。2、对于大鼠的年龄,好像要求不太严格,文献上记载一般用3~5 weeks,但我用12 weeks的大鼠做也能成功。2. 75%乙醇中消毒5~15min。3. 无菌条件下取腹股沟部、肾、附睾周围的脂肪组织,用Hanks(Hanks配置较麻烦,用PBS也无妨)反复冲洗3次。4. 用剪刀将脂肪组织剪成1mm小块,置于1mg/ml胶原酶中,37℃水浴(空气
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