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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
43
- 英文名:
Buffered glycerol - Sodium Chloride Solution
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
250g
1) 合成培养基:
各种成分完全是已知遥各种化学物质 组成成分精确 重复性强。
2) 天然培养基:
由天然物质制成 这类培养基的化学成份不恒定 但配制方便 营养丰富培养效果好 常常被采用。
3) 半合成培养基:
在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类 或在合成培育基的基础上添加某些天然成分 更能有次的满足微生物对营养的需要。
| 产品名称 | 英文名称 | 产品规格 |
| 缓冲甘油-氯化钠溶液 | Buffered glycerol - Sodium Chloride Solution | 250g |
产品名称:缓冲甘油-氯化钠溶液
英文名称:Buffered glycerol - Sodium Chloride Solution
产品规格:250g
产品用途:用于检测产气荚膜梭菌时样品的贮存用途:用于检测产气荚膜梭菌时样品的贮存。成分(g/L)氯化钠 4.2磷酸氢二钾 12.4磷酸二氢钾 4.0pH值7.2 25℃用法称取本品 20.6g,另取 100ml甘油,加热溶解于 900ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌 15分钟,备用。注:配制双料缓冲甘油-氯化钠溶液(20%)时,用甘油 200ml,和蒸馏水 800ml。
缓冲甘油-氯化钠溶液实验方法:
1.培养基阳性组:取稀释后的各试验菌悬液1ml分别加于预先制备的试管培养基中,每种细菌接种两支试管。同时分别取1ml菌悬液加于无菌空平皿中,用于计数,每种细菌做两个平板。
2. 培养基阴性组:即空白对照,即不添加菌液。
3. 接种量计数:步骤1中的平皿中,细菌倾注胰酪大豆胨琼脂培养基,霉菌和白色念珠菌倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基。同时每种培养基做1个空白。
4.培养条件:
无菌检查:20~25℃培养14天或直至出现浑浊(不超过14天)
MPN计数:30~35℃培养箱中培养3天
控制菌检查:30~35℃培养箱中培养18~24小时
倾注计数用的的胰酪大豆胨琼脂培养基平板置30~35℃培养箱中培养3天
倾注计数用的沙氏葡萄糖琼脂培养基平板置20~25℃培养箱中培养3~5天
缓冲甘油-氯化钠溶液操作步骤:
(一)准确称量试剂:根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。
(二)校正ph值:将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用ph6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1n naoh和1n hcl调节ph值到适宜范围内。
(三)过滤:将玻璃漏斗置铁架上,再用纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。
(四)分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5ml;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。
(五)灭菌:培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到彻底灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下,菌体吸收水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。
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缓冲甘油-氯化钠溶液1,2,3,4TETRAHYDRO1ACETYLQUINOLINE1酰1,2,3,4四啉4169191
NA3%化蛋白胨水
Dihydro2methyl3(2H)thiophenone二23(2H)13679851
Glycine tert butyl ester hydrochloride甘氨叔27532963
4,4'Isopropylidenebis[2(2,6dibromophenoxy)ethanol]2,2双[4(2羟氧)3,5二溴]丙4162452
PXYLOQUINONE2,5二对醌137188
Sodium phenylphosphinate次膦4297954
2,4'Dibromoacetophenone2,4'二溴99730
FmocN'AcetylLlysineFmocN'酰L赖氨159766560
Ammonium 1pyrrolidinedithiocarbamate二代铵5108963
5Methylindole5吲哚614960
NA2苄5酰水杨苄
1,3Thiazole2carbaldehyde2酰唑10200596
GLYCYLDLPHENYLALANINE甘氨DL丙氨721664
NEOTHORIN偶砷Ⅰ3547384
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文献和实验用TMRITC或RB200标记,发红色荧光,可以明确显示两种抗原的定位。 五、对照试验 为了保证免疫荧光细胞化学染色的准确性,排除某些非特异性染色,必须在初次试验时进行以上对照试验: 1.直接法 需设下述对照试验 (1)标本自发荧光对照:标本只加PBS或不加PBS,缓冲甘油封片,荧光显微镜观察应呈阴性荧光(无与特异性荧光相似的荧光)。 (2)抑制试验:可分为二步法和一步法。 ①二步抑制法:标本先加未标记的特异性抗体,再加标记荧光抗体,结果应呈阴性或明显减弱的荧
7)封片 为了长期保存,我们一般用缓冲甘油等封片,此外还有专门的抗荧光萃灭封片液。避免产生气泡,方法是直接在载玻片组织上滴一滴封片液,然后一手拿住盖片某一拐角,而另一手拿对面的那个拐角,接近封片液近端的拐角先降低,直至接触到液体时为止;当发现液体接触面在不断弥散时,则可以缓慢降低另一拐角,这样一般不会产生气泡。 8)切片清洗为了防止一抗、二抗等试剂残留而引起非特异性染色,所以适当地加强清洗(延长时间和增多次数)尤为重要,我一般在一抗孵育前的清洗是 3 min*3 次,而一抗
较适宜。已有人报道采用脾内免疫,可提高小鼠对抗原的免疫反应性,且节省时间,一般免疫3天后即可融合。 2、细胞融合 (1) 主要试剂的配制 a、 细胞培养基 杂交瘤技术中使用的细胞培养基主要有RPMI-1640或DMEM(Dulberco Modified Eagles Medium)两种基础培养基,具体配制方法按厂家规定的程序,配好后过滤除菌(0.22um),分装,4℃保存。 不完全RPMI-1640培养基:RPMI-1640培养基原液96ml
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