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500- 5000 µl
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文献和实验P20, P100 2 ~ 3 mm P200, P1000 2 ~ 4 mm P5000 3 ~ 6 mm 4) 释放溶液:将微量移液器头 与容器壁接触,慢慢压下按钮至第一段,停一两秒再压至第二段,把溶液完全压出。 使用注意事项 1) 勿将微量移液器本体浸入溶液中。 2) 吸取黏度高之试液,请先将微量移液器头尖端以刀片或剪刀将出口切大,并先行预润后再吸取。 3) 吸取酸液或具腐蚀性溶液后,请将微量移液器拆
、在立体显微镜下,可以看到明显的 3D 结构。使用 200μl 移液器吸头从每个孔中收集球状体,并将大约 50 个球状体集中到 5ml 微量离心管中。 中肠和后肠球状体生长成人肠类器官 11、收集球状体后,将微量离心管垂直放置在管架上 10min,此时球体通过重力沉降到离心管底部。吸出上清,控制总体积在 25μl 左右。 12、将冻存的 Matrigel 在 4℃ 下过夜解冻,添加 B-27 补充剂(终浓度 1×)、R-spondin1 (终浓度 500ng/ml),Noggin (终浓度100
密度,200 µl/well的体积加入到TrueGel3D® HTS 水凝胶平板中。 注:细胞密度可根据特定的分析参数进行调整,例如培养天数。 每2-3天更换一次培养基。注意:使用透射光显微镜随时跟踪培养状态。细胞铺板后,HA-MSC会出现在水凝胶顶部,但在大约24小时内,它们将开始侵入水凝胶,水凝胶形成3D网络,如下一节所示。 为了诱导分化,将培养基更换为成骨或成脂肪分化培养基,并监测14-21天以上,每2-3天更换一次培养基。注:分化14-21天后,细胞将含有Oil-Red-O 阳性细胞(脂肪
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