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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
186
- 适应物种:
人/动物/植物等
- 应用:
用于科研试剂实验
- 检测方法:
elisa法
- 检测范围:
科研试剂
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
48T/96T
人阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)ELISA试剂盒试剂盒特点
A. 分子量大。合成肽采用化学方法制备,由于工艺的局限,合成数量有限,只能达到数百个氨基酸;而利用基因工程制备的抗原,分子量更大。
B. 稳定性。包被的抗原的稳定性可使试剂盒的效期得到保证,早期以合成肽为包被抗原的试剂盒效期只3-4个月,采用基因工程抗原后效期大大延长了。
C. 基因工程抗原将特异性抗原决定簇基因融合表达,表达产物包含更多的抗原决定簇,可提高试剂盒的灵敏度,提高检出率。
D. 纯化难度大。基因工程抗原的纯化技术难度较大。
人阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)ELISA试剂盒操作注意事项:
1) 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2) 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3) 不用的其它试剂应包装或盖。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4) 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
5) 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6) 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
7) 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
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文献和实验酶的ELISA试剂盒中使用的洗板液一般为含0.05% Tween20的中性PBS,Tween20为一种非离子去垢剂,既含亲水基团,也含疏水基团,其在洗涤中的作用机理是,借助其疏水基团与经疏水性相互作 用被动吸附于聚苯乙烯固相上蛋白的疏水基团形成疏水键,从而削弱蛋白与固相的吸附,同时在其亲水基团与液相中水分子的结合作用下,促使蛋白质脱离固相而进 入液相,这样就可达到去掉非特异吸附物的目的,但由于抗体或抗原的包被通常也是通过在碱性条件下与固相的疏水性相互作用而被动吸附于固相,因此要注意非离 子去垢剂的使用
一、标本的收集和保存 用于ELISA测定的临床标本最为常用的是血清。 (1)要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,因此,在以HRP为标记酶的ELISA测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很容易在温育过程中吸附于固相,从而与后面加入的HRP底物反应显色。 (2)样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌
,但由于奶粉的成份复杂,而且封闭后的载体不易长期保存,因此在试剂盒的制备中较少应用。 封闭是否必要,取决于ELISA的模式及具体的实验条件。并非所有的ELISA固相均需封闭,封闭不当反而会使阴性本底增高。一般说来,双抗体夹心法,只要酶标记物是高活性的,操作时洗涤彻底,不经封闭也可得到满意的结果。特别是用单抗腹水直接包被时,因其中大量非抗体蛋白在包被时同样也吸附在固相表面,业已起到了类似封闭剂的作用。但在间接法测定中,封闭一般是不可少的。包被好的ELISA板干燥后放入密封袋或锡袋中,在低温可保存数月
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