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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
163
- 适应物种:
人/动物/植物等
- 应用:
用于科研试剂实验
- 检测方法:
elisa法
- 检测范围:
科研试剂
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
48T/96T
人ADP核糖转移酶4(ART4)ELISA试剂盒试剂盒特点
A. 分子量大。合成肽采用化学方法制备,由于工艺的局限,合成数量有限,只能达到数百个氨基酸;而利用基因工程制备的抗原,分子量更大。
B. 稳定性。包被的抗原的稳定性可使试剂盒的效期得到保证,早期以合成肽为包被抗原的试剂盒效期只3-4个月,采用基因工程抗原后效期大大延长了。
C. 基因工程抗原将特异性抗原决定簇基因融合表达,表达产物包含更多的抗原决定簇,可提高试剂盒的灵敏度,提高检出率。
D. 纯化难度大。基因工程抗原的纯化技术难度较大。
人ADP核糖转移酶4(ART4)ELISA试剂盒操作注意事项:
1) 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2) 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3) 不用的其它试剂应包装或盖。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4) 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
5) 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6) 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
7) 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
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文献和实验一、TUNEL法的实验原理 细胞发生凋亡时, 染色体DNA双链或单链断裂产生大量的粘性3'-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端,从而可进行凋亡细胞的检测,这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)。由于正常的或正在增殖
特异性的引物PCR扩增。基因经过30-35个循环的一轮PCR扩增。50μl PCR扩增产物中的15μl在1.2%E-Gel®琼脂糖凝胶电泳检测,在紫外光下观察。 泳道1:HPRT(次黄嘌呤磷酸核糖转移酶),1.3kb,30拷贝/细胞 泳道2:SMAP(胸腺激素受体共激活蛋白),3.1kb 泳道3:Cleavage and polyadenylation specificity factor,4.5kb 泳道4:TFRC(转铁蛋白受体),5.0kb 泳道5:IGFⅡR(类胰岛素生长因子Ⅱ受体
c,用-20度预冷的丙酮冷冻固定10分钟 d,PBS清洗 10minX2 e,用新鲜配制的通透液(含0.1%的Triton X-100和0.1%的柠檬酸钠溶液) 室温通透15min。 f,PBS清洗 10minX2 g. 阳性对照组加入DNase I 40ul(1u/ul),37度孵育15min h. PBS清洗 10minX2 i. Roehe试剂盒中的的TUNEL反应缓冲液(含FITC标记的dUTP)和脱氧核糖 核酸末端转移酶
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