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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 适应物种:
人/动物/植物等
- 应用:
用于科研试剂实验
- 检测方法:
elisa法
- 检测范围:
科研试剂
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
48T/96T
人周期素依赖性激酶4(CDK4)ELISA试剂盒试剂盒特点
A. 分子量大。合成肽采用化学方法制备,由于工艺的局限,合成数量有限,只能达到数百个氨基酸;而利用基因工程制备的抗原,分子量更大。
B. 稳定性。包被的抗原的稳定性可使试剂盒的效期得到保证,早期以合成肽为包被抗原的试剂盒效期只3-4个月,采用基因工程抗原后效期大大延长了。
C. 基因工程抗原将特异性抗原决定簇基因融合表达,表达产物包含更多的抗原决定簇,可提高试剂盒的灵敏度,提高检出率。
D. 纯化难度大。基因工程抗原的纯化技术难度较大。
人周期素依赖性激酶4(CDK4)ELISA试剂盒操作注意事项:
1) 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2) 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3) 不用的其它试剂应包装或盖。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4) 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
5) 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6) 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
7) 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
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文献和实验3 篇 Nature 连发,解决世纪难题,周期蛋白的毁灭调控蕴含癌症患者的新生
细胞周期是细胞生命活动的基本过程,受到细胞内外信号交互作用的精密调控。D 型细胞周期蛋白 (cyclin D1, D2 和 D3) 与细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinases,CDKs)是整个细胞周期调控机制中的核心分子,驱动细胞增殖。细胞周期失调是人类癌症的一个共同特征,其中 cyclin D-CDK4/6 复合物的水平和活性与不受约束的细胞增殖密切相关。自从 20 世纪 90 年代发现 cyclin D 以来,人们就对其进行了深入研究,但是关于 cyclin
只在siRNA靶向DONSON处理的细胞中下调80%。 在GDF3转染的细胞中,周期素E2只有轻微改变。 如果我们对在相同样品中上调的基因进行分析,那么在两个样品中上调最强烈的是p21,也被称为周期素依赖的激酶抑制剂1a。 当与转染siGFP的对照细胞相比时,p21在GDF3和DONSON siRNA转染细胞中分别上调1.81-3.31倍(图4)。 图4:细胞周期基因表达水平的变化。显示了在RealTime ready细胞周期检测预制板中检测的所选基因表达水平(周期素和周期素依赖的激酶
于细胞周期依赖性激酶(CDK),该酶只有与细胞周期素(cyclins)结合才有活性,可促进细胞周期中G1→S和G2→M的转变。在细胞周期素中最有意义的是细胞周期蛋白D(cyclin D),它能激活CDK2、4、5,促进细胞由G1期进入S期,进行DNA合成。 目前认为p53、p16、Rb基因与G1-S调节点有关。p53基因的表达产物p53蛋白的作用机制主要是间接作用于细胞周期,p53可促进P21蛋白(CDK2的抑制剂)的表达,从而在细胞周期中抑制G1期至S期的转换,阻碍细胞进入DNA合成期
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