- ¥1800 - 5800
- gelatins
- JNC-Y1423
- 2025年07月09日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型：
ATCC
- 供应商：
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 库存：
50-100万
- 生长状态：
良好
- 年限：
5年
- 运输方式：
常温避光
- 器官来源：
Human/人
- 细胞形态：
贴壁
- 物种来源：
Human/人
- 组织来源：
细胞形态
- 英文名：
PT67
- 规格：
T25
| 目录号 | JNC-Y1423 |
| 细胞英文(简称） | PT67 |
| 细胞名称 | PT67小鼠逆转录病毒包装细胞 |
| 背景资料 | 收到细胞，请查看瓶子是否有破裂，培养基是否漏出，是否浑浊，如有请尽快和我们联系。如包装完，取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒,拆下封口膜,在显微镜下观察细胞形态是否正常，细胞的贴壁情况以及细胞密度,然后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时，以稳定细胞状态。 |
| 细胞来源 | ATCC |
| 代次 | P3 |
| 规格 | T25 |
| 细胞数 | 50-100万 |
| 生物安全级别 | 2 |
| 组织来源 | 细胞形态 |
| 贴壁 | 细胞活力 |
| 95％（Viability by Trypan Blue Exclusion） | 细胞检测 |
| 细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌 | 培养条件 |
| RPMI-1640 +10% FBS；37℃，5% CO2 | 传代方法 |
| 建议1:2-1:3 两天换液一次 | 冻存条件 |
| 完全培养基50%+40%FBS+10%DMSO |
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文献和实验问：构建逆转录病毒为载体的DNA（质粒），阳离子脂质体2000（过期的），转染病毒包装细胞pt67，G418筛选，在换液和传代过程中均会有细胞死亡（贴壁细胞漂浮）。求教原因。换液3.6ml DMEM+0.4ml新生牛血清+24μlG418传代用胰酶ph 7.2，1ml，用0.3ml新生牛血清中和，800rpm离心5min，弃上清，加入上述培养液。答：做一下G418浓度筛选，另外你的对照组未转染的细胞经同样浓度G418筛选后怎样呢？是否本来细胞状态不好？或是根本没有转进去呢？还有就是脂质
问：大家好，请问有人做过逆转录病毒包装吗，我最近在用PT67包装病毒，按照说明书上的要求，在细胞长到70%左右汇合时加入质粒和脂质体和无血清培养液培养4小时后更换为完全培养基继续培养24小时后加300μg/MLG418筛选，现在加药已经36个小时了，可是看细胞长的密密麻麻的大概有100%了吧，还不见细胞往下掉，我真是急死了，300μg/ml的筛选浓度是我在预实验里确定的应该错不了，可是为什么加药以后细胞还不死呢，说明书上说70%汇合时转染后还要继续培养24-36小时再加药，我知道这是要让抗性
tydyhan：我一直做细菌这块，对病毒操作不是很懂，请教大家：建立表达某基因的重组逆转录病毒载体的B16细胞系含某基因的重组逆转录病毒载体已获得，需转染PA 317包装细胞，通过G418筛选获得表达某基因的重组逆转录病毒。Polybrene进行转染B16细胞，筛选阳性转化克隆，获得稳定表达的B16细胞株。这里怎么具体进行操作??丁香园网友adychen认为：１、首先最好选择的是带ＥＧＦＰ逆转录病毒载体，方便以后的转染率和感染率的观察．２、重组载体；３、得出载体抗性基因的抗生素最佳细胞筛浓度
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