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- gelatins
- JNC-Y2080
- 2025年07月09日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型：
ATCC
- 供应商：
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 库存：
50-100万
- 生长状态：
良好
- 年限：
5年
- 运输方式：
常温避光
- 器官来源：
Mouse/小鼠
- 细胞形态：
贴壁；成纤维细胞样
- 物种来源：
Mouse/小鼠
- 组织来源：
胚胎
- 英文名：
PA317
- 规格：
T25
| 目录号 | JNC-Y2080 |
| 细胞英文(简称） | PA317 |
| 细胞名称 | PA317小鼠成纤维细胞 |
| 背景资料 | PA317细胞株源自TK- NIH/3T3细胞，通过pBR322中的包装结构DNA(pPAM3)和pBR322中的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因共同转染构建而成。 通过感染或转染将逆转录病毒载体导入这些细胞，结果生成可以感染许多哺乳动物细胞的双嗜性载体颗粒。 这株细胞生成的病毒颗粒已成功地用于将基因导入人类。 可能因为用于构建这株细胞而转入的DNA丢失，能够包装逆转录病毒载体的PA317细胞百分比随传代而减少。 在包含0.03 mM 次黄嘌呤, 0.001 mM 氨甲喋呤和0.02 mM 胸苷的培养基中短暂(大约5天)选择，可以选出保留了包装功能的细胞。 选择后，细胞应在HT培养基(0.03 mM 次黄嘌呤,0.02 mM 胸苷)中培养4天，以稀释残留的氨甲喋呤。 |
| 细胞来源 | ATCC |
| 代次 | P3 |
| 规格 | T25 |
| 细胞数 | 50-100万 |
| 生物安全级别 | 2 |
| 组织来源 | 胚胎 |
| 细胞形态 | 贴壁；成纤维细胞样 |
| 细胞活力 | 95％（Viability by Trypan Blue Exclusion） |
| 细胞检测 | 细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌 |
| 培养条件 | DMEM （高糖）+10% FBS；37℃，5% CO2 |
| 传代方法 | 建议1:2-1:3 两天换液一次 |
| 冻存条件 | 完全培养基50%+40%FBS+10%DMSO |
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文献和实验小鼠胚胎成纤维细胞的富集1、给13-14天的孕鼠注射大约0.5ml阿佛丁。当鼠麻醉后，实施断颈法处死小鼠。2、用70％乙醇擦拭腹部，把皮肤向后拉，暴露出腹膜。用消毒过的工具，剪开腹壁以暴露出子宫角。将子宫角移到10cm的皿里。用10ml不含钙镁离子的PBS洗三遍。3、用剪刀剪开每一测的胚囊,并将胚胎移到培养皿中。4、用两副钟表镊子将胎盘和膜与胚胎分离开，分离后切除内脏（所有深色的东西）。将胚胎转移到(有盖)培养皿中，用10ml不含钙镁离子的PBS洗三遍。5、用带有弯钩的眼科剪将组织剪碎，当你剪
小鼠胚胎成纤维细胞的富集 1、给13-14天的孕鼠注射大约0.5ml阿佛丁。当鼠麻醉后，实施断颈法处死小鼠。 2、用70％乙醇擦拭腹部，把皮肤向后拉，暴露出腹膜。用消毒过的工具，剪开腹壁以暴露出子宫角。将子宫角移到10cm的皿里。用10ml不含钙镁离子的PBS洗三遍。 3、用剪刀剪开每一测的胚囊,并将胚胎移到培养皿中。 4、用两副钟表镊子将胎盘和膜与胚胎分离开，分离后切除内脏（所有深色的东西）。将胚胎转移到(有盖)培养
实验材料： 1. 肾组织：取自8周龄健康雌性小鼠； 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.2； 3. 0.1%明胶：为生长基质成分，在取材前先用它包被培养瓶的生长面； 4. 消化液：0.1%胰蛋白酶溶液； 5. 培养液：DMEM培养液，补充20%的胎牛血清、成纤维细胞生长因子（α-FGF）2µg/ml、庆大霉素100µg/ml、青霉素100IU/ml、链霉素100µg/ml； 6. 用于细胞
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