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PCR Markers, 50-2000 bp, Affymetrix/USB
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见产品说明书
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见产品说明书
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国外
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见产品说明书
- 规格:
250microL
PCR Markers, 50-2000 bp, Affymetrix/USB
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文献和实验,1000,2000 bp 片段,以 pBS 质粒为模板扩增 1500 bp 片段。 模板:pUC19 质粒 30 ng/50 μL or pBS 质粒 30 ng/50 μL PCR 扩增程序: 循环数 Step 温度 时间 1 1 94 ℃ 2 min 35 1 94 ℃ 45 sec 2 55 ℃ 45 sec 3 72 ℃ 2 min 1 1 72 ℃ 5 min 2.质粒菌液直接扩增: 以 pUC19 菌液为模板扩增 100,250,500,750,1000
Troubleshooting for PCR and multiplex PCR
of these ingredients in the PCR mix are: 50 mM KCl; 10 mM Tris-HCl; 1.5 mM MgCl2).QUESTIONS and SOLUTIONS1. I get (many) longer unspecific products. What can I do? Decrease annealing time Increase annealing temperature Decrease extension time Decrease extension
酶。使用 PlatinumTaq DNA 聚合酶,在 94℃ 进行 2 分钟就可以恢复 90% 的 Taq DNA 聚合酶活性。 二、Touch-down PCR Touch-down PCR 又称降落 PCR,即选定一个温度范围,如 50—35 ℃ ,每降 1-2 ℃ 进行 1-2 个循环,然后在 50 度下进行 15 个循环。 Touch-down 的原理:随着退火温度的降低,特异性逐步降低,但特异性条带在温度较高时已经扩增出来,其浓度远远超过非特异性条带,随着退火温度的降低,特异性条带优先
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