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JX033022PES 一次性针头滤器 33mm,0.22u
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文献和实验3在1200g条件下离心10分钟; 注意:可延长离心的时间,去除更多的粒细胞,从而获得纯度更高的PBMC; 4离心后,管内样品从上往下分层如下:血浆-白膜层-分离液-隔层-分离液-红细胞沉淀; 5直接将隔板上层液体快速倾倒入另一无菌离心管中(有少许红细胞贴于隔层上方为正常现象,因其离心后贴壁不会随上层液体倾倒出来); 注意:倾倒隔板上层液体时需迅速,且一次性完成,勿反复倾倒。通常白膜层距离下方隔板尚有一段距离,因此倾倒时也不必将全部上层液体全部倒尽。 6加入PBS
从单个小鼠肿瘤样本中分选高纯度、高活性 TIL 细胞亚群的完整工作流程
封闭的无污染的一次性分选盒中进行,分选过程中不会有气溶胶的产生。因此既可保障不同的分选过程不会发生样品间交叉污染,又可以最大限度的保障实验室操作人员的安全。 实验结果及分析 1. 组织解离器和磁珠分选仪可以为细胞分选提供高纯度和高活力的 TIL 细胞。 小鼠肿瘤组织经分离试剂进行单细胞分离和磁珠分选仪的预富集,可提供纯度高达 81.5% TIL 细胞样本用于随后的细胞分选 (见图 A,经特异性免疫磁性预富集后的 CD45+ 肿瘤浸润性淋巴细胞 , TILs)。 2. MACSQuant® Tyto® 细胞
1.针头滤器的使用丁香园网友heyj的观点为:用滤膜孔径为0.22um的一次性针头滤器过滤胰酶,一次可以过滤100ml。如果想一次性过滤完可以准备1-2个备用的。注意在配胰酶溶液时尽量完全溶解,否则未溶的颗粒会堵住滤孔影响过滤速度。本人认为过滤效果与滤过的液体量无关。丁香园网友ssl3304的观点为:过滤0.25的胰酶,一次可以滤1L,没有问题的,培养基最多300-400ml,总之一定要充分溶解后再过滤。丁香园网友shaoqianqian的观点为:滤200ml培养液足够了,可是不能滤加
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